CY5.5-卵清蛋白(CY5.5-Ovalbumin,CY5.5-OVA)是一种将远红外荧光染料CY5.5卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)通过共价偶联形成的荧光标记物,兼具卵清蛋白的生物化学特性和CY5.5的近红外荧光特性。

一、基本特性

组成与结构

  • CY5.5:一种远红外荧光染料,属于花菁类(Cyanine)染料家族,最大吸收波长为740 nm,发射波长为760 nm,适用于深层组织成像和多色荧光成像。
  • OVA(卵清蛋白):从鸡蛋清中提取的球状蛋白质,分子量约45 kDa,具有良好的生物相容性和低免疫原性,表面含有大量赖氨酸残基和羧基官能团,便于与CY5.5的NHS酯型衍生物进行共价偶联
  • 偶联方式:通过酰胺化反应,将CY5.5的NHS酯与OVA分子表面的氨基结合,形成稳定的酰胺键。

物理性质

  • 外观:固体、粉末或液体形态。
  • 溶解性:溶于PBS、Tris等缓冲液,部分产品可溶于水。
  • 纯度:95%。
  • 稳定性:在生理条件下稳定,不易受到光漂白的影响,能够保持长时间的荧光信号。

结构式:

CY5.5-OVA,CY5.5-卵清蛋白,CY5.5-Ovalbumin
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CY5.5-OVA,CY5.5-卵清蛋白,CY5.5-Ovalbumin

二、制备方法

主要步骤

  • 活化OVA:将OVA溶解于PBS缓冲液(pH 7.4-8.0),确保蛋白稳定且氨基处于未质子化状态,提高亲核活性。
  • CY5.5标记:将CY5.5-NHS酯溶解于少量无水DMSO中,缓慢加入OVA溶液中,同时轻轻搅拌,避光在室温或4℃下反应1-4小时。
  • 纯化:通过透析、凝胶过滤或超滤去除未反应的CY5.5-NHS和其他小分子杂质。
  • 表征:利用紫外-可见光谱(检测CY5.5吸收峰约675 nm和OVA蛋白特征吸收280 nm)、荧光光谱(检测近红外发射峰约695-700 nm)和SDS-PAGE(在荧光成像下检测蛋白标记情况)确认产物的结构和荧光特性。

三、注意事项

  • 用途:仅供科研使用,不可用于人体实验。
  • 保存条件:避光保存于-20℃,避免反复冻融。

温馨提示:供应产品仅用于科研,不能用于人体!
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