相较于皮下接种,原位接种CDX模型能更真实还原肿瘤与宿主组织的相互作用,为药物组织渗透性和微环境响应研究提供可靠平台。该技术对操作精度要求极高,需掌握三大核心要点。
术前准备需精准定位接种坐标。以肝癌原位模型为例,需暴露小鼠肝左叶,选择距肝缘2mm、避开大血管的实质区域作为注射点。细胞悬液体积严格控制在30-50μL,过量会导致包膜下渗漏,过少则影响成瘤率。爱思益普采用显微外科技术,在体视显微镜下完成操作,将细胞精准递送至目标组织。
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术中操作强调无菌与快速。开腹时间超过10分钟将显著增加术后感染风险,因此需提前预冷细胞悬液、预热手术器械。进针深度根据组织厚度调整——肝脏约3-4mm,胰腺约2-3mm,过深易损伤血管,过浅则形成皮下种植。推注后需维持针尖原位10秒,待组织回弹封闭针道后再拔针,防止细胞反流。
术后管理是模型成功的保障。原位接种术后需单独饲养48小时,提供软质饲料和温水。每日监测体重(下降>15%需干预)和腹部体征(腹水、腹胀提示并发症)。成瘤监测依赖影像学——超声检查可在接种后7天探测到早期病灶,生物发光成像(BLI)则适用于荧光素酶标记细胞系的实时追踪。
爱思益普已建立肝、肺、胰腺、脑等多器官原位接种SOP,成瘤率稳定在75-85%。结合IVIS活体成像系统,可实现肿瘤生长动态监测,为药效评价提供精准时间节点。
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