做科研、搞研发、管样本库的人,大概率都绕不开同一个问题:样本采完,下游实验却不能立刻跑 —— 冻存这一步,到底该怎么做才能保住数据可靠性?
前段时间筹备课题预实验,需要一批合格的组织样本做前期验证,被导师一句话直接拦下:「没必要花新经费收样本,实验室液氮罐里压了一批陈年老样本,你先拿去用。」
起初觉得液氮低温稳定,顶多 RNA 稍微降解,做预实验够用了。结果细胞样本复苏后活力明显下降,上机数据与新鲜样本差异显著,UMAP 聚类出现偏移,部分细胞亚群信号偏弱甚至丢失。排查所有变量后,才确认:问题出在冻存方案本身,常规冻存液无法有效保护细胞在冻融过程中的生物信息完整性,导致冻存样本难以真正替代新鲜样本用于高精度多组学分析。
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这个问题,其实不只发生在高校实验室里。很多科研企业 & CRO 研发端,临床试验样本需分批次留存,普通冻存方案导致跨周期样本质量劣化、批次间数据一致性差,直接影响申报数据的可靠性,被迫重新采样将大幅拉长研发周期。标准化生物样本库则面临另一重压力:海量临床样本需长年归档,常规冻存方案对多组学检测兼容性不足,长期保存后核酸与蛋白信息持续衰减,难以满足行业质控标准。
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示例
不仅限于降解问题!这些样本为何不能用?
这是很多实验室、生物样本库、药企研发平台共同面临的难题:液氮罐里存放多年的组织、细胞样本,到底还能不能用?
不少课题组和研究团队为控制经费、缩短周期,会优先复用已冻存的存量样本。以为低温就能「锁住」样本质量,真正上机检测才发现:数据不稳、细胞亚群分布偏移、结果难以复现。问题的根源在于,样本冻存从来不是 「加保护液放进液氮就完事」——PFA 残留毒性、复苏后细胞凋亡激活、高浓度冷冻保护剂对下游实验的干扰,都在悄悄侵蚀样本的生物信息完整性,而这种损耗在单细胞多组学高分辨率检测下会被放大暴露,成为基础科研、转化医学、工业研发与公共资源库共同的瓶颈。
这一问题也有明确的标准约束。无论是国内《生物样本库质量和能力通用要求》,还是国际 ISO20387:2018 生物样本库通用标准,都明确了正规生物样本冻存的核心要求为:长期保存后的样本须保持完整性,确保实验数据可重复、可溯源。以 PFA 为代表的冻存方案,分别在多组学兼容性、核酸完整性与蛋白抗原活性上存在固有局限,已难以满足当下高精度单细胞多组学研究与行业规范化样本库质控标准的双重要求。
BD OMICS Guard™ CRYO 采用非交联、无血清的温和冻存体系,从根源上同时规避强化学交联的不可逆损伤与冻融应激的细胞毒性问题,完美解决蛋白表位掩蔽、核酸降解、冻融损伤等核心痛点。
它在稳定保存样本形态的同时,最大程度保留核酸完整性、蛋白抗原活性与细胞原生状态,不仅避免了 PFA 交联导致的表位封闭、信号丢失,也有效降低了该冻存方案中冻融带来的细胞活力损耗与批次差异,大幅延缓长期冻存中的生物信息衰减,全面提升样本复用价值与实验稳定性。
表 1:PFA 与 BD OMICS Guard™ CRYO 在样品冻存上的区别
新型固定技术:五大核心优势,从根源保住样本质量
面对传统冻存方式的种种局限,BD OMICS Guard™ 冻存液凭借五大核心优势破解样本保存难题:
多类型样本兼容支持:PBMC、组织、全血、细胞悬液等多种样本,全面适配不同实验的样本保存需求;
方案标准,操作简易:配方标准化,操作流程简单易上手,有效减少批次间误差,保障实验结果稳定;
长效稳定储存:样本在 -80 ℃ 可稳定保存 5 个月,液氮环境下可稳定保存 9 个月,预留充足实验周期;
完整留存生物信息:无蛋白交联、RNA 断裂及蛋白构象改变问题,不存在血清污染风险;低 DMSO 配方可维持高细胞存活率,为下游实验提供优质样本;
应用场景广泛:不仅适配日常各类科研场景的细胞、样本保存的需求,更拥有经过充分验证的流式细胞分析、单细胞测序(单细胞转录组、蛋白组、ATAC 、VDJ 全长测序等)应用案例。
应用案例展示:
数据验证显示,BD OMICS Guard™ CRYO 冻存样本与新鲜样本表现高度一致:
1)外周血单个核细胞(PBMC)在 -80 ℃ 保存 10 天、60 天或液氮环境保存 9 个月后,基因表达水平与新鲜样本高度一致;
2)各储存时间节点的细胞亚群分布比例与新鲜样本差异 < 10%;
3)同时冷冻保存样本的抗体染色、蛋白表达敏感性也得以完整保存;
4)PBMC、淋巴结、肺癌组织等样本长期冻存后,仍能获得高质量单细胞数据;
5)全血样本冻存后,RNA 与蛋白质数据同样保持高质量。
综上,BD OMICS Guard™ CRYO 凭借非交联核心优势、极简操作与长效稳定的保存能力,为肿瘤免疫、临床转化及细胞治疗等前沿单细胞多组学研究,提供了标准化、高合规性的优质样本保存解决方案。
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内容策划:沈佳钰
内容审核:李琳
题图来源:图虫创意
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