肠出血性大肠杆菌O157检测试剂盒(胶体金法)
科普:深圳市恒昊生物科技有限公司
什么是肠出血性大肠杆菌
大肠杆菌是一类广泛存在于自然界和人与动物肠道中的细菌,绝大多数大肠杆菌都是无害的共生菌,但肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli, 简称EHEC)是其中致病性极强的一个类群,属于革兰氏阴性致病菌。
在肠出血性大肠杆菌的众多血清型中,O157:H7是最具代表性、也是对公共卫生威胁最大的血清型,它能产生志贺毒素,这种毒素会损伤肠道上皮细胞,引发出血性腹泻,严重时还会发展为溶血性尿毒综合征、血栓性血小板减少性紫癜,对儿童、老年人以及免疫力低下人群的威胁尤其大,甚至可能危及生命。
这种病菌的传播主要依赖粪口途径:被污染的生鲜食材(比如未煮熟的牛肉、生奶、被污染的蔬菜瓜果)、被污染的水源,或是接触了带菌动物/患者的排泄物,都可能造成感染,在餐馆、学校、社区等人群聚集场所很容易暴发聚集性疫情。
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胶体金法是基层场景、现场快速检测中非常常用的免疫学检测方法,O157胶体金检测试剂盒的检测原理可以总结为“抗原抗体特异性结合+胶体金显色示踪”,具体过程如下:
- 标记准备
- 试剂盒的胶体金垫上,预先固定了被胶体金颗粒标记的抗O157特异性抗体;检测线(T线)固定了另一株可识别O157抗原的抗体,质控线(C线)则固定了可以结合金标抗体的二抗。
- 样本层析过程
- 检测时将处理后的样本滴加到试剂盒的加样孔中,样本会因为层析作用沿着试纸条向吸水端移动:
- 如果样本中含有O157大肠杆菌抗原,抗原会先和胶体金垫上的金标抗体结合,形成“金标抗体-抗原”复合物,这个复合物继续向前移动到T线位置时,会被T线上的抗体捕获,聚集成可观测到的红色条带;多余的金标抗体会继续移动到C线,被C线的二抗捕获形成红色质控条带。
- 如果样本中不含O157抗原,那么金标抗体不会携带抗原聚集在T线,T线不会显色,只有C线会形成红色条带。
- 结果判读
- 阳性:C线、T线都出现红色条带,说明样本中存在O157大肠杆菌;
- 阴性:仅C线出现红色条带,T线不显色,说明样本中未检出O157;
- 无效:C线不显色,无论T线是否显色,都说明检测失效,需要重新检测。
这种方法操作简单,不需要大型仪器,10-15分钟就可以出结果,非常适合食品快速筛查、基层现场初筛使用,灵敏度和特异性也能满足初筛需求,是食品安全监测和公共卫生应急检测中非常实用的工具。
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