大连力迪流体控制技术有限公司,是德国Scienova 实验室透析产品的国内总代,供应透析管、透析器、深孔板、透析管夹、透析膜等产品。国内设有7个办事处,可及时到达客户现场。

一.Scienova MD100微量透析器在CyBi-Felix工作站实现自动化透析操作的介绍

CyBi®-FeliX 自动液体处理系统与 Scienova MD100 结合使用,通过尿素去|除和蛋白质回收实现酶再激|活的完整透析过程。该程序被证明可以显著提高样品通量和处理准确性。

去|除变性剂既耗时又困难,因此,Scienova GmbH 提供了一种简单、经济高|效且快速的透析系统,采用流行的 96 孔微孔板形式。通过其设计和低结合力再|生纤维素膜,这些“Xpress 微量透析器”(MD) 易于操作,并具有出色的样品回收率。

二.Scienova MD100微量透析器介绍

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Scienova MD100 由一个 48 深孔板、一个网格和六排管段组成,每排有8个管段,是一款多种节流分子量可选(3.5、6-8、12-14 kDa)的微量透析器(可同时处理 48 个样品)。

在网格的帮助下,所有微型透析器都具有明确的位置和良好的抓地力。此外,网格中的空闲位置可用于透析时的缓冲液处理。

三.Scienova MD100微量透析器的应用

  • 从样品中去|除变性剂
  • 蛋白质、寡核苷酸、RNA 或 DNA 的样品透析
  • 缓冲液交换、再缓冲
  • 去|除染料
  • 脱盐
  • 样品浓缩

四.Scienova MD100微量透析器在CyBi-Felix工作站实现自动化透析操作的目的

胰蛋白酶在高尿素浓度存在下被可逆地抑|制。为了恢复胰蛋白酶活性,需要通过释放对硝基苯胺 (PNA) 来去|除尿素,这可以通过透析来实现。

为了证明蛋白质与膜结合不会造成样品损失,将不同的牛血清白蛋白 (BSA) 溶液透析 2 小时,并分析回收的样品。

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五.Scienova MD100微量透析器在CyBi-Felix工作站实现自动化透析操作的实验过程

以下实验,使用了截留值为 6-8 kDa 且样品体积为 100 μl 的 MD 100 透析管段。

实验 1:通过去|除尿素实现酶再激|活

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将微量透析器置于 4.4 ml 透析缓冲液中,放入网格中,并通过 CyBi-FeliX® 填充 100 μl 胰蛋白酶样品。在室温 (22 °C) 下透析 60 分钟,用尿素代替 40 个样品 (n=40) 和 8 个不使用尿素的样品 (n=8)。孵育时间后,将样品转移到 96 孔微孔板中进行测量。

图:胰蛋白酶活性的恢复

实验 2:BSA 回收

将微量透析器置于4.4 ml A.deion 中。放入网格中,并通过CyBi-FeliX®填充100μl BSA 样品。对于每种浓度,在室温(22℃)下透析6个样品(n=6)和2个参比(n=2)120 分钟。孵育时间后,将样品转移到 96 孔微孔板中进行测量。

六.Scienova MD100微量透析器在CyBi-Felix工作站实现自动化透析操作的实验结论

下表显示了取决于尿素浓度的 PNA 释放速率rr。透析1小时后,尿素浓度从8M降到0.3M

结果表明,1 小时后可以恢复约 75% 的胰蛋白酶活性。总的来说,所有 48 个样品的标准偏差都较低,这表明具有良好的稳定性和可重复性。Scienova MD100和 CyBi-FeliX® 的组合可在不损失质量的情况下实现高样品通量,可用于 Scienova 微量透析器的所有应用。

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图:尿素去|除