大小鼠三箱社交行为箱,XR-XJ117,上海欣软
实验分为适应、社交偏好、社交记忆三个阶段。
正常小鼠既偏好同类,又能区分熟悉与陌生个体;厌食应激小鼠存在双重缺陷:
一是主动回避同类(社交退缩),二是无法分辨新旧刺激鼠(社交记忆受损)。
仅统计时长无法拆分两种缺陷,通过偏好指数、记忆指数双指标并行,可分别量化社交动机与识别能力,排除运动能力干扰。
二、标准化前期准备
实验箱体由三等分透明有机玻璃构成,每格长宽高 40cm×40cm×35cm,两侧金属笼规格统一,避免空间差异。
环境光照 500lux,隔音房间,温度 22±1℃。刺激鼠选用同周龄同性,提前 1 周单独饲养,未与受试接触。
实验前 30min 将受试移入行为房适应,雌性同步记录动情周期。
每只测试完毕用 75% 酒精擦拭箱体与金属笼,左右侧笼位置随机调换,消除位置偏好。
整套实验放在旷场、新物体识别之后,NSFT、强迫游泳前进行,避免强应激压制社交探索。
三、改良分段测试流程
适应期 10min:两侧空笼,小鼠自由穿梭三室,记录总活动距离,作为运动校正参数;
社交偏好期 10min:一侧放入陌生鼠,另一侧空笼,统计两侧停留时长,计算社交偏好指数;
社交记忆期10min:保留原有熟悉鼠,另一侧更换全新陌生鼠,统计新旧鼠侧停留时长,计算社交记忆指数。
行为判定标准:小鼠头部、前半身进入隔间才算有效停留,仅探头不计入时长。
社交偏好指数 =(陌生鼠侧时长 - 空笼侧时长)/ 总探索时间 ×100,指数显著降低代表社交退缩;
社交记忆指数 =(新鼠侧时长 - 熟鼠侧时长)/ 总社交时长 ×100,指数下降代表社交识别记忆受损。
校正逻辑:若总活动距离组间无差异,双指数同时下降,提示厌食小鼠兼具社交回避与记忆缺陷;
仅偏好指数降低、记忆指数正常,说明仅动机受损,无记忆障碍;总距离同步下降则为活动量不足,不能判定社交缺陷。
五、实操误差规避要点
刺激鼠躁动扑笼,会造成受试恐惧,人为降低社交探索;
两侧光照、笼具松紧不一致,形成位置偏好干扰结果;
单只测试结束未彻底除味,残留气味影响下一只小鼠社交选择;
只看单一偏好数据,无法区分社交动机与记忆损伤,表型解释缺乏说服力。
参考文献
1. Nadler J J, et al. A novel test of social interaction and social recognition in mice [J]. Nature Protocols, 2004, 1 (1):120-128. 范式原始建立文献。
2. Yang S, et al. Separation of social withdrawal and social memory deficits in chronic stress anorexia model [J]. Behavioural Brain Research, 2022, 432:113976. 双指数区分改良依据。
3. 周欣悦,等。改良三箱社交实验区分社交动机与记忆损伤 [J]. 中国比较医学杂志,2023, 33 (8):70-77.
4. Silverman J L, et al. Standardization of three-chamber social test for stress-related animal models[J]. Journal of Visualized Experiments, 2015(97):e5241.
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