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图1左发育中斑马鱼脑内血管的GFP表达,最大强度投影。右发育中肾脏附近的GFP表达血管,最大强度投影。

背景

吉尔金教授及其多学科团队致力于将先进的光子学和光学技术应用于生命科学领域的挑战,在此案例中即为活体斑马鱼的成像。通过使用选择性平面照明显微镜(SPIM),可以对活体斑马鱼跳动的心脏(1)和发育中的眼睛(2)进行成像与分析。

使用一种结合了视觉心脏同步方法的自制SPIM成像系统(3);一种包含光束扫描的SPIM变体(数字SPIM或D-SPIM),以及一种新型空间频率域成像系统(专利申请中),Girkin教授及其团队拥有丰富的成像技术,用于对活体样本进行检测。

挑战

吉尔金教授告诉我们,为了可视化斑马鱼的心跳,“一台在近红外波段工作的高速摄像机,利用跳动心脏的透射图像和实时分析软件,来同步光片和荧光成像摄像机,从而有效地‘冻结’心脏的运动。荧光成像摄像机必须具备高灵敏度以及准确且可重复的快门操作,以便在心脏周期的正确时刻捕捉图像。”

D-SPIM系统也有类似的要求,需要精确的摄像机控制电子设备和软件来维持同步,以及低噪声灵敏摄像机来发挥该方法的优势。在对发育中的斑马鱼眼睛进行成像时,即使在24-48小时的研究周期内,也需要在低光照条件下获得良好的信号。

对于新型空间频率域成像技术,Girkin教授告诉我们:“这是一种极佳的穿透组织成像方法,特别是使用近红外光时,对皮肤成像效果尤为出色。因此需要一台高灵敏度的相机,在我们的应用中,它还需具备一定的近红外(约800纳米)成像能力。”

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Iris 9在快速活体成像过程中表现出了对低光照水平的高灵敏度,同时也满足了确保图像精确同步所需的时间精度。我们对心脏进行了超过一小时的成像,期间始终保持着成像的时间锁定,充分证明了该相机的性能。——约翰·吉尔金教授

解决方案

Iris 9 满足了这些众多显微成像技术的所有成像要求,正如 Girkin 教授所确认的:“我们现在用 Iris 9 替换了之前的相机,它在快速成像所需的低光照水平下表现出极高的灵敏度,同时也满足了确保同步正确的时序要求。我们对心脏进行了超过一小时的成像,且始终没有丢失成像的时序锁定,这充分证明了该相机的性能。”

Iris 9 与 D-SPIM 系统配合良好,其高灵敏度被用于研究发育中斑马鱼眼内单个细胞的运动 (1),Iris 9 在这方面“展现出比我们之前的相机显著的优势”。