人可溶性瘦素受体(sLR)ELISA Kit

作者:深圳市恒昊生物科技有限公司

什么是人可溶性瘦素受体(sLR)

可溶性瘦素受体是由膜结合型瘦素受体经过蛋白酶剪切或者可变剪接后产生的游离型受体,主要存在于人体的血液、脑脊液等体液中。它的核心生理功能是结合循环中的瘦素,一方面延长瘦素在体内的半衰期,调节游离瘦素的生物活性;另一方面作为瘦素运输的载体,协助瘦素穿过血脑屏障作用于中枢神经的调控区域。现有研究已经证实,人体血清sLR浓度变化和肥胖、2型糖尿病、非酒精性脂肪肝等代谢类疾病的发生发展密切相关,因此准确定量检测sLR对疾病机制研究、早期诊断都有着重要意义。

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实验操作注意事项

(一)试剂盒与样本保存

  1. 试剂盒未开封时需要在2~8℃避光保存,不可冷冻,避免冻融导致包被抗体失活;若试剂盒开封后未一次用完,需将剩余板条密封放入自封袋,放回2~8℃保存,建议1个月内用完,避免抗体受潮或污染。
  2. 采集后的样本若无法及时检测,血清/血浆样本需分装后放在-20℃或-80℃保存,避免反复冻融——反复冻融会导致sLR蛋白降解,使得检测结果偏低;一般避免超过3次冻融,长期保存建议置于-80℃。样本融化检测前需要充分混匀,避免沉淀。
  3. 标准品、生物素标记抗体、酶标亲和素一般需要低温保存,使用前提前取出平衡至室温,用完后及时放回低温,避免长期放置在室温导致活性下降。

(二)试剂准备

  1. 所有试剂使用前都需要充分摇匀,避免浓度不均影响结果,但摇匀过程中避免剧烈震荡产生过多气泡,加样时气泡会导致吸光度读数误差。
  2. 洗涤液一般为浓缩液,需要按照说明书要求用去离子水或双蒸水稀释,若冬季温度较低浓缩液出现结晶,可提前放置室温待结晶溶解后再稀释,不影响使用。
  3. 标准品需要现用现配,按照说明书梯度稀释成对应浓度,稀释过程要充分混匀,避免梯度浓度不准确导致标准曲线偏移