社交互动是啮齿类重要本能行为，社交回避、社交识别缺陷是自闭症、精神分裂症、神经发育损伤模型的核心表型。
三箱社交实验（Three-chamber social interaction test）是目前社交行为评价的经典范式，可分阶段解析小鼠社交趋向性、社交新奇偏好、社交记忆。依托上海欣软VisuTrack行为分析系统，自动追踪动物轨迹、分区统计探索时长，规避人工计时带来的主观偏差，满足高分期刊数据溯源要求。
一、实验核心原理
装置分为左、中、右三个独立腔室，腔室之间由小门连通。实验分为两个阶段：
第一阶段为社交偏好测试，一侧放置陌生同龄小鼠，另一侧放置空金属笼，观察受试小鼠偏好社交目标还是空笼；
第二阶段为社交识别测试，一侧放置已经熟悉的小鼠，另一侧放入全新陌生小鼠，检测动物对新社交个体的偏好。
正常小鼠倾向于主动接触陌生同类，社交障碍模型小鼠则社交探索减少、对新个体缺乏偏好。该范式无电击、无高强度应激，适合神经发育、精神疾病模型的行为学表型筛选。
二、标准化实验硬件配置
整套系统包含三腔式亚克力箱体、两个相同金属隔离笼、高清摄像模块、VisuTrack行为分析软件。
小鼠三箱社交行为实验箱，XR-XJ117，上海欣软
箱体为哑光不透明材质，消除环境反光干扰；中间通道小门可手动开合，金属笼孔隙可保证小鼠之间嗅觉、视觉感知，但无法发生肢体打斗。
箱体顶部俯视摄像头，在软件内预先划分三个腔室以及金属笼周边的社交兴趣区（ROI），自动识别小鼠头部靠近笼体的社交探索行为。实验环境保持暗光、低噪音，消除外界刺激干扰。
三、标准化实验流程
1. 适应阶段：左右两个腔室均放置空金属笼，打开两侧通道门，受试小鼠放置在中间腔室，自由探索整个箱体10 min，完成环境适应，消除新环境应激。测试结束取出小鼠，75%酒精擦拭箱体。
2. 社交偏好测试：一侧金属笼放入陌生刺激小鼠，另一侧保留空笼，受试小鼠置于中间腔室，通道门全部打开，记录10 min。VisuTrack记录小鼠在两个目标区域的探索时长、访问次数，评价基础社交动机。
3. 社交识别测试：将原来的陌生小鼠留在原笼，另一侧笼内放入一只全新同龄陌生小鼠，继续记录10 min。统计小鼠对熟悉个体、新陌生个体的探索行为，评估社交记忆与社交新奇偏好。每只小鼠测试结束，彻底清洁箱体，更换刺激小鼠，避免气味残留干扰后续实验。
四、核心检测指标（软件自动输出）
VisuTrack可自动输出全套社交行为参数：社交目标区探索时长、空笼区探索时长；
新个体探索时间、熟悉个体探索时间；社交偏好指数、社交识别指数；
各腔室停留时间、总运动距离、运动速度。
可区分两种表型：单纯活动能力下降，或是特异性社交缺陷，排除基础运动、焦虑状态对社交结果的干扰。
五、实验优势与应用场景
三箱社交实验可分层解析社交动机和社交识别记忆，是自闭症谱系障碍、精神分裂症、颅脑损伤、神经发育干预、药物对社交环路调控研究的核心范式。
实验操作标准化、可重复性强，全程视频自动采集，轨迹热力图、时序数据可直接导出用于文章配图，适配高水平期刊的数据规范。
六、标准化质控要点
刺激小鼠的年龄、体重、性别需要与受试小鼠匹配；
实验前刺激小鼠提前适应金属笼，减少应激挣扎；
每轮测试后箱体、金属笼充分除味，杜绝残留气味；
设置盲法分析，降低人工主观判断；
控制环境光线与噪音，避免应激抑制社交探索行为。
VisuTrack自动识别兴趣区内的社交探究行为，减少人工计数误差，实现三箱社交实验标准化采集与分析。
参考文献
[1] Moy S S, et al. Sociability and social recognition deficits in BTBR T+tf/J mice[J]. Genes Brain Behav, 2004, 3(5):287-302.
[2] Yang M, et al. Three-chamber social interaction test in mice[J]. Nature Protocols, 2011,6(2):197-207.
[3] 上海欣软. 啮齿类三箱社交行为检测技术规范[Z].2024.
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