深圳市艾瑞斯仪器有限公司生产的药品中西布曲明胶体金检测卡胶体金颗粒是将氯金酸等原料通过特定方法(如柠檬酸钠还原法)“烧制”而成的纳米级悬浮液。目前常规工艺可获得粒径约40纳米的颗粒,呈酒红色。追求更高的敏感性则需要将颗粒做到10纳米甚至更小,这样的胶体金溶液性状更澄清、流动更佳,抗体标记效率会显著倍数提升。这些微小的金颗粒就像一个“载体”,可以与抗体(对于西布曲明这类小分子药物,通常使用其特异性抗体)稳定结合,形成可见信号的“源头”——即胶体金标记物。
其次,对于西布曲明这类小分子化合物(无法同时与两个抗体结合,即难以使用夹心法),竞争抑制法是更适配的原理。如图1所示,检测卡的工作流程如下:在检测区的T线位置,会预先包被有西布曲明-载体蛋白偶联物(抗原)。C线则包被有用于识别的通用抗体(如羊抗鼠抗体)。
西布曲明胶体金检测卡
当含有待测西布曲明的溶液滴加到样品垫上,它会向前流动。流动会先复溶含有抗体(图中为1)与荧光标记微粒结合而成的标记物。这里的标记物是抗体,能与待测物——西布曲明(图中标为B)特异性结合,也能与T线上的固定化抗原(X)结合。
竞争就此发生:
样品中不含西布曲明(阴性):液态混合物中仅有(Y)标记结合物在C线处的聚集显示(图中表现为与C线形成复合物)。这种聚集仅代表标记物本身的功能。
样品中含有西布曲明:待测的西布曲明分子会与T线位点处的竞争,争夺有限的特异性识别靶点(抗体)上的位点。样品中的浓度越高,竞争效率越明显,T线处的信号(显色强度)就越弱甚至不显色。若该区域的信号被(样品)阻断未显现(标记微粒未被捕获),T线不显色即为阳性。无论T线信号情况如何,C线都应出现作为“实验有效”的质量控制带。
样品处理
1、颗粒、片剂、胶囊:压碎成粉末,用小勺子量取一平勺(即0.25g)加入到FOB管中,充分混匀;
2、液体:用铝箔袋中的一次性滴管吸取待测样品10滴或200微升于FOB管中,充分混匀;
胶体金快速检测卡
使用步骤
1、测试前先完整阅读使用说明书,使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温(20℃~30℃)。
2、从原包装袋中取出检测卡,水平放置于检测员正面,如上图所示(打开后请在10分钟内使用)。
3、如上图所示,打开FOB管最上面的盖子,垂直向下滴加3滴样本溶液于检测卡的加样孔中。
4、结果应在5—10 分钟读取,其他时间判读无效。
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