从总Tau到磷酸化Tau：神经退行性疾病研究中Tau抗体的全面选型指南

从总Tau到磷酸化Tau：神经退行性疾病研究中Tau抗体的全面选型指南

在阿尔茨海默病和其他tau蛋白病研究中，Tau蛋白的检测是核心实验环节之一。Tau蛋白是一种微管相关蛋白，主要分布于神经元轴突中，其生理功能是促进微管组装和稳定微管结构。在阿尔茨海默病中，Tau蛋白的异常磷酸化导致其从微管上解离，聚集成配对螺旋丝，最终形成神经原纤维缠结。Tau蛋白的检测涉及总Tau和磷酸化Tau两个层面——总Tau抗体用于检测不依赖特定磷酸化状态的Tau蛋白，是Western blot、免疫组化和免疫细胞化学中最广泛使用的工具；磷酸化Tau抗体则能够区分磷酸化与非磷酸化Tau，是研究病理机制的关键工具。不同实验场景对抗体的要求各不相同，抗体的选择直接影响实验数据的可靠性。

本文从总Tau抗体和磷酸化Tau抗体两个层面出发，围绕Western blot、IHC等不同实验场景，系统梳理Abcam Tau抗体的产品特点、验证数据与适用条件，为神经退行性疾病研究中的Tau抗体选型提供一份从总Tau到磷酸化Tau的全面参考。

一、用于Tau蛋白检测的最常用抗体

总Tau抗体用于检测不依赖特定磷酸化状态的Tau蛋白，是Western blot、免疫组化（IHC）和免疫细胞化学（ICC/IF）中最广泛使用的工具。

Anti-Tau antibody [EP2456Y]（ab76128）是Abcam最经典的总Tau重组单克隆抗体，自2009年上市以来已被35篇同行评审文献引用。该抗体为兔重组单克隆抗体，可检测人、小鼠和大鼠样本中的Tau蛋白。在Western blot中，以1/10000稀释度可清晰检测小鼠和大鼠脑裂解液中的Tau蛋白。在IHC-P中，以1/2000稀释度对人脑组织进行染色，可在Leica BOND® RX仪器上30分钟内完成孵育。此外，该抗体还适用于流式细胞术（胞内）和ICC/IF，并提供无载体版本（ab174727）。该抗体可以识别Tau 3R和4R异构体，Abcam测试还显示其不与MAP2或MAP4发生交叉反应，是总Tau蛋白检测的首选工具。

Anti-Tau antibody (ab75714)是一款鸡多克隆抗体，适用于WB、IHC-P和ICC/IF，可检测人、小鼠、大鼠样本。该产品由两种经亲和纯化的抗肽抗体组合而成，总抗体浓度为200 μg/ml。在IHC-P中，5 μg/ml对人阿尔茨海默病脑组织海马CA1区进行染色，采用热介导抗原修复（柠檬酸钠缓冲液pH 6.0，20分钟）。

二、针对磷酸化形式Tau的抗体

Tau蛋白的异常磷酸化是tau蛋白病的核心病理特征。针对特定磷酸化位点的抗体能够区分磷酸化与非磷酸化Tau，是研究病理机制的关键工具。

Anti-Tau (phospho S396) antibody [EPR2731]（ab109390） 是Abcam磷酸化Tau抗体中被引用次数最多的产品，已获得180篇文献引用。该抗体为兔重组单克隆抗体，在阿尔茨海默病患者样本中经过验证。在Western blot中可检测人、小鼠、大鼠样本中的磷酸化S396 Tau；在冷冻切片IHC中，官网推荐稀释度为 1/100；官网验证数据显示 1/1000 稀释度下室温孵育 15 分钟即可检测人阿尔茨海默病脑组织中的磷酸化 S396 Tau；在石蜡切片中，0.1 μg/ml即可对人脑皮层进行染色。该抗体还适用于免疫沉淀和Dot blot，提供无载体版本。

Anti-Tau (phospho T181) antibody [EPR22064]（ab223192）是一款靶向T181位点的兔重组单克隆抗体，适用于IP、Dot blot、WB和I-ELISA。在Western blot中，1/1000稀释度可检测人脑裂解液中的磷酸化T181 Tau；用碱性磷酸酶处理膜后可消除信号，验证了其磷酸化特异性。在免疫沉淀中，可从0.35 mg人脑裂解液中成功富集靶标，该克隆还提供无载体版本ab240579。

Anti-Tau (phospho T217) antibody [EPR24654-24]（ab288160）是一款靶向T217位点的兔重组单克隆抗体，适用于夹心ELISA、间接ELISA、Dot blot和WB。该抗体的突出优势在于该克隆的无载体版本ab288167已在人脑脊液和血浆样本中得到验证——在阿尔茨海默病患者与健康对照之间，脑脊液样本的效应量（effect size）达14.7，血浆样本为 4.5。该抗体的无载体版本（ab288167，或专用捕获版本ab314558）可作为夹心ELISA中的捕获抗体（125 ng/孔），与总Tau抗体配对使用。

Anti-Tau (phospho S199) antibody [EPR2401Y]（ab81268）靶向S199位点，已被22篇文献引用。该抗体为兔重组单克隆抗体，适用于Dot blot和WB。在Western blot中，官网推荐稀释度为1/5000–1/20000；官网验证数据显示，在1/1000稀释度下可检测人海马组织裂解液和转染人Tau表达载体的293T细胞中的磷酸化S199 Tau，磷酸酶处理可消除信号。

三、经过免疫组化（IHC）验证的Tau抗体

IHC是研究Tau蛋白在脑组织中分布和病理聚集形态的核心方法。

Abcam的Anti-Tau Alzheimer‘s Disease antibody [GT-38] - Conformation-Specific（ab246808）是一款独具特色的构象特异性抗体。该抗体为小鼠单克隆抗体，可优先识别与阿尔兹海默病相关的病理Tau构象，并用于检测同时含有3R和4R Tau的阿尔兹海默病Tau病理。该抗体适用于IHC-P和IHC-Fr和ELISA，已在阿尔茨海默病患者样本中经过验证。需要注意的是，官网标注该抗体可作为捕获抗体使用（但作为检测抗体的效果未获验证，Abcam 也未系统评估其夹心配对兼容性）；该克隆由 Abcam 生产，并提供无载体版本（ab254274）及 Alexa Fluor® 488/555/594/647 等多种直标版本，便于不同实验平台选用。

四、总结：不同实验场景下的Tau抗体选型建议

回到Tau抗体选型的核心问题，从总Tau到磷酸化Tau，不同实验场景下的选择逻辑可以归纳如下：

总Tau检测——Anti-Tau antibody [EP2456Y]（ab76128）是Abcam最经典的总Tau重组单克隆抗体，自2009年上市以来已被35篇同行评审文献引用，可检测人、小鼠和大鼠样本中的Tau蛋白。在Western blot中，以1/10000稀释度可清晰检测小鼠和大鼠脑裂解液中的Tau蛋白；在IHC-P中，以1/2000稀释度对人脑组织进行染色，可在Leica BOND® RX仪器上30分钟内完成孵育。该抗体可识别Tau 3R和4R异构体，且不与MAP2或MAP4发生交叉反应。Anti-Tau antibody（ab75714）为鸡多克隆抗体，适用于WB、IHC-P和ICC/IF，由两种经亲和纯化的抗肽抗体组合而成。

磷酸化Tau检测——Anti-Tau (phospho S396) antibody [EPR2731]（ab109390）是Abcam磷酸化Tau抗体中被引用次数最多的产品，已获得180篇文献引用。在Western blot中可检测人、小鼠、大鼠样本中的磷酸化S396 Tau；在石蜡切片中，0.1 μg/ml即可对人脑皮层进行染色。Anti-Tau (phospho T181) antibody [EPR22064]（ab223192）在Western blot中1/1000稀释度可检测人脑裂解液中的磷酸化T181 Tau，用碱性磷酸酶处理膜后可消除信号，验证了其磷酸化特异性。Anti-Tau (phospho T217) antibody [EPR24654-24]（ab288160）的无载体版本ab288167已在人脑脊液和血浆样本中得到验证——在阿尔茨海默病患者与健康对照之间，脑脊液样本的效应量达14.7，血浆样本为4.5。Anti-Tau (phospho S199) antibody [EPR2401Y]（ab81268）在Western blot中推荐稀释度为1/5000–1/20000。

IHC检测——常规总Tau IHC-P可选择ab76128；阿尔茨海默病病理构象特异性检测可选择Anti-Tau Alzheimer‘s Disease antibody [GT-38]（ab246808），该抗体为小鼠单克隆抗体，可优先识别与阿尔茨海默病相关的病理Tau构象，适用于IHC-P和IHC-Fr，并提供无载体版本（ab254274）及Alexa Fluor® 488/555/594/647等多种直标版本。

上述产品均可通过Abcam官网（abcam.cn）查询货号、验证数据与文献引用记录，并直接在线下单；多数产品提供20 μL小包装，便于先做小规模验证。采购前建议结合自身样本类型、检测平台和实验需求，选择匹配的验证应用与稀释条件。