人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA KIT

作者：深圳市恒昊生物科技有限公司

什么是人sTRAIL ELISA Kit？

TRAIL是肿瘤坏死因子（TNF）超家族的成员，天然状态下主要以跨膜蛋白形式表达于免疫细胞（如T细胞、NK细胞）表面，跨膜TRAIL可以被蛋白酶剪切释放到细胞外基质和体液中，形成可溶性的sTRAIL。sTRAIL保留了完整的生物学活性，能够特异性结合肿瘤细胞表面的死亡受体（DR4、DR5），启动凋亡信号通路，诱导肿瘤细胞凋亡，而对正常细胞几乎无毒性，是肿瘤免疫调控研究中极具潜力的分子标志物。

人sTRAIL ELISA Kit是专门用于定量检测人血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等生物样本中可溶性sTRAIL浓度的商用酶联免疫吸附试剂盒，通过抗原抗体特异性结合的原理实现精准定量，对比免疫印迹、流式细胞术等检测方法相比，具备操作简便、通量高、可实现绝对定量、对样本需求量低的优势，适合大样本量的临床样本筛查与基础科研检测场景。

注意事项

打开网易新闻 查看精彩图片

为获得准确、可重复的检测结果，操作过程中需注意以下关键环节：

（一）样本采集与保存

  1. 不同类型样本处理规范：
  • 血清样本：采集全血后室温静置30分钟使其自然凝固，2~8℃下1000g离心15分钟分离上层血清，若无法及时检测需分装后置于-20℃或-80℃保存，避免反复冻融，反复冻融会导致sTRAIL蛋白降解，造成检测值偏低。
  • 血浆样本：推荐使用EDTA、肝素作为抗凝剂，禁止使用柠檬酸钠、EDTA-K2等可能影响抗原结合的抗凝剂，采集后1小时内离心分离血浆，保存方式同血清。
  • 细胞培养上清：收集上清后3000g离心10分钟去除细胞碎片和沉淀，取上清检测；若样本中细胞碎片较多，可再次离心取上清，避免杂质干扰反应。
  • 组织匀浆：取适量组织样本加入预冷的PBS（pH7.2-7.4）充分研磨，离心后取上清检测，避免组织残留导致非特异性结合。
若待测样本中sTRAIL浓度超出试剂盒检测上限，需使用试剂盒提供的样本稀释液按比例稀释后再检测，避免出现“钩状效应”导致结果假性偏低。

（二）试剂准备规范

  1. 试剂盒从2~8℃取出后，需在室温（20~25℃）平衡至少30分钟，确保试剂温度均一，否则会影响抗原抗体结合效率，导致标准曲线偏移。未用完的试剂需及时放回2~8℃保存，生物素标记抗体、酶标试剂需避光保存。
  2. 浓缩洗涤液需用去离子水或双蒸水按说明书比例稀释，若低温下洗涤液出现结晶时，需提前37℃水浴溶解结晶后再稀释，避免盐浓度异常影响洗涤效果。
  3. sTRAIL标准品需现用现配，不要提前配制后放置，避免蛋白降解导致标准曲线不准确