卵巢早衰（POF）是40岁以下女性面临的严峻临床问题，发病率为1%～3%，表现为促卵泡激素（FSH）水平升高、雌二醇（E2）下降、继发性闭经和不孕。现有激素替代疗法存在子宫内膜癌和乳腺癌等风险，干细胞治疗尚处于探索阶段。氧化损伤被认为是POF的重要驱动因素。随年龄增长，卵巢内自由基生成增多，而清除能力下降。Nrf2是调控细胞抗氧化反应的核心转录因子，能驱动下游GCLC、HO-1、NQO1等酶的表达来对抗活性氧（ROS）。NLRP3炎症小体激活则与卵巢衰老密切相关。天然产物瑞香素已知可激活Nrf2，但其在卵巢中的作用尚未阐明。吉林大学团队在Frontiers in Pharmacology杂志发表了一项研究，通过野生型和Nrf2基因敲除小鼠，揭示了瑞香素通过Nrf2/TXNIP/NLRP3轴保护D-半乳糖诱导POF的机制。
研究方法
研究者将6～8周龄雌性C57BL/6小鼠分组，皮下注射不同剂量D-半乳糖[200、400、600 mg/（kg·d）]共42天，确定600 mg/（kg·d）为造模浓度。随后在野生型和Nrf2-/-小鼠中设5组：对照组、D-半乳糖组、D-半乳糖+低剂量瑞香素组[15 mg/（kg·d）]、D-半乳糖+高剂量瑞香素组[30 mg/（kg·d）]及阳性对照维生素E组。通过阴道涂片监测动情周期，ELISA测血清FSH和E2，试剂盒测卵巢组织SOD活性和GSH含量，H&E染色计数各级卵泡，免疫组化和蛋白印迹检测p16、klotho、Nrf2、GCLC、HO-1、NQO1、TXNIP、NLRP3的表达。
研究结果
1.Nrf2缺失加重D-半乳糖诱导的卵巢损伤
Nrf2敲除小鼠对D-半乳糖的损伤效应更为敏感。与野生型相比，Nrf2-/-小鼠在D-半乳糖处理后动情周期紊乱更明显，间期显著延长；血清FSH升高幅度和E2下降幅度均更大；卵巢GSH和SOD水平降得更低。NLRP3和衰老标志物p16蛋白表达显著上升，抗衰老蛋白klotho明显减少。这说明Nrf2缺失降低了卵巢抗氧化储备，使组织更易遭受氧化攻击，Nrf2在维持卵巢功能中扮演关键角色。
2.瑞香素剂量依赖性地挽救卵巢功能与卵泡发育
在野生型POF小鼠中，瑞香素干预后血清FSH降低、E2升高，且高剂量[30 mg/（kg·d）]效果与维生素E相当。H&E染色显示，D-半乳糖组原始卵泡、初级卵泡和窦卵泡比例下降，闭锁卵泡增多；瑞香素处理后各级正常卵泡数量回升，闭锁卵泡减少，呈剂量依赖性。这表明瑞香素能有效保护卵巢结构完整性。
3.瑞香素调节衰老相关蛋白表达
免疫组化和蛋白印迹显示，D-半乳糖导致p16在颗粒细胞和卵母细胞中高表达，klotho显著下降；瑞香素干预后p16表达被抑制，klotho水平回升。说明瑞香素可逆转D-半乳糖诱导的细胞衰老表型。
4.瑞香素激活Nrf2并抑制NLRP3炎症小体
D-半乳糖组Nrf2及下游GCLC、HO-1、NQO1表达下调，SOD活性和GSH含量降低；瑞香素处理后这些指标均回升。同时，D-半乳糖上调了TXNIP和NLRP3，瑞香素则显著抑制其表达。提示瑞香素通过激活Nrf2驱动抗氧化酶系统，并抑制TXNIP/NLRP3炎症通路。
5.Nrf2敲除消除瑞香素的保护效应
在Nrf2-/-小鼠中，瑞香素无法降低FSH、升高E2，也无法恢复GSH和SOD水平；卵泡计数未见改善；p16和klotho表达不受影响；NQO1、HO-1、TXNIP、NLRP3等指标均无显著变化。这证实瑞香素完全依赖Nrf2通路发挥保护作用，缺乏该靶点时药物失效。
综上，该研究明确了Nrf2/TXNIP/NLRP3轴在POF中的关键地位，验证了瑞香素作为Nrf2激活剂通过抑制氧化损伤和炎症反应来保护卵巢功能。瑞香素已在类风湿关节炎等领域有临床应用基础，未来或可成为POF治疗的新选项，但安全性和有效性尚需临床试验验证。
参考文献
Zhang M, Yu X, Li D, et al. Nrf2 Signaling Pathway Mediates the Protective Effects of Daphnetin Against D-Galactose Induced-Premature Ovarian Failure[J]. Frontiers in Pharmacology, 2022, 13: 810524.
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