一、实验原理

新物体识别实验（NOR）依托啮齿类动物天然偏好探索陌生物体的本能，是非奖赏、非应激的学习记忆评价模型，多用于评估物体识别记忆、检测药物 / 脑损伤对认知功能的影响。

小鼠在熟悉环境中记住原有物体；当其中一个物体更换为全新物体时，记忆正常的小鼠会花费更多时间探索新物体；通过识别指数量化记忆能力。

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和水迷宫区分：水迷宫偏向空间参考记忆，存在游泳应激；新物体识别侧重物体识别记忆，无强迫游泳，应激更低，适合快速大批量认知药物筛选。

二、实验材料准备

  1. 实验动物：C57BL/ICR 小鼠，体重 18–24 g，分雌雄饲养，适应性饲养≥3 d，12h 明暗循环，室温 22±2℃，自由采食饮水。
  2. 实验器材：方形避光实验箱、两组外形 / 材质不同物体（不易被咬坏，大小适配小鼠）、75% 乙醇。
  3. 采集分析系统：小动物行为视频分析系统（上海欣软 VisuTrack）、高清摄像头、计时器。

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大小鼠通用型新物体识别，XR-XX117，上海欣软

三、标准操作步骤

实验分为 3 个阶段，全部在安静弱光环境完成：

1.适应期（第 1 天）：将小鼠背对箱中心放入空实验箱，自由探索 5 min，消除环境应激。实验结束取出小鼠，75% 酒精擦拭箱体，去除气味残留。

2.熟悉期（第 2 天）：箱内对称放置两个完全相同物体，小鼠放入箱内自由探索 5 min，记录对两个物体的探索时长。探索定义：鼻子距离物体≤2 cm，朝向物体嗅探；爬上物体不计入探索时间。结束后取出小鼠，清洁箱体与物体。

3.测试期（间隔 24 h，第 3 天）：将其中一个旧物体替换为形状 / 材质不同的新物体，物体位置随机调换，避免位置偏好干扰。放入小鼠，记录 5 min 内对新物体 (N)、旧物体 (F) 的探索时间。

4.数据计算

识别指数 RI = 新物体探索时间 ÷（新物体探索时间 + 旧物体探索时间）×100%

RI＞50%，提示动物具备良好物体识别记忆；认知损伤模型 RI 接近 50%。

5.实验完成，动物按伦理规范处置，箱体、物体彻底清洁，消除气味遗留。

四、关键注意事项

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  1. 物体选择：两组物体嗅觉、亮度要区分开，重量稳固防止倾倒；定期互换新旧物体组别，抵消物体本身偏好。

  2. 气味是最大干扰源：每只小鼠测试后必须擦拭箱体与物体，禁止使用带香精的消毒剂；实验人员不要喷香水。

  3. 动物状态：尽量在动物暗周期（活跃时段）测试；小鼠焦虑水平过高会减少探索，造成假阳性记忆下降。

  4. 探索判定标准必须统一，推荐使用上海欣软 VisuTrack 自动追踪，减少人工计时带来的主观误差。

  5. 伦理要求：全部动物实验需要机构动物伦理委员会批准，遵循 3R 原则。

五、适用研究场景

阿尔茨海默病模型认知功能评价、促认知药物筛选、脑外伤 / 缺血后记忆损伤评估、神经环路与物体记忆机制研究。

六、参考文献

[1] 张均田。现代药理实验方法（第 2 版）[M]. 北京医科大学出版社，2012.

[2] 李悦，等。新物体识别实验影响因素的研究进展 [J]. 中国药理学通报，2020.

[3] Antunes M, Biala G. The novel object recognition memory: neurobiology, test procedure, and its modifications [J]. Cognitive Processing,2012.

[4] Leger M, et al. Object recognition test in mice [J]. Nature Protocols,2013.

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