罗丹明B标记人血清白蛋白(简称RB-HSA,常见修饰形式也包括RB-PEG-HSA)是红色荧光标记的多功能科研探针,既保留罗丹明B稳定的荧光特性,也保留了人血清白蛋白天然生物学活性。
基础结构与制备原理
罗丹明B标记人血清白蛋白是通过化学偶联将罗丹明B(RB)共价连接到人血清白蛋白(HSA)分子得到的荧光标记蛋白,仅用于科学研究,不可用于临床或人体应用。
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- 制备核心流程: 通常使用带活性官能团(NHS酯/异氰酸酯)的罗丹明B,在pH 7.2-8.5的缓冲体系中与HSA的氨基发生酰胺化反应,控制罗丹明B与HSA的摩尔比调节标记率(通常摩尔标记率为2-6:1),反应完成后通过透析、凝胶过滤或HPLC去除未结合的游离罗丹明B,最后通过荧光光谱、SDS-PAGE验证产物纯度和标记率。
- 外观与溶解性:一般为橙红色冻干粉,易溶于水、PBS生理缓冲液,带PEG修饰的产品溶解性更优。
特性
- 荧光性能优异:罗丹明B的荧光量子产率高,抗光漂白能力强,信号稳定,比FITC更适合需要长时间观察或多次扫描的成像实验;其发射波长处于红光区,可有效降低生物样本背景自发荧光干扰,信噪比更高。
- 活性保留完整:共价偶联不破坏HSA的天然构象,保留了HSA结合小分子药物、激素、脂肪酸的能力,以及低免疫原性、优异生物相容性的特点,可真实模拟HSA在生物体系中的行为。
- 适配多色成像实验:RB的橙红色荧光通道与FITC(绿色)、Cy5(近红外)、DAPI(蓝色)完全区分,无明显信号串色,可搭配其他探针实现多分子共定位观察,适合复杂样本成像。
- 性质稳定:共价键连接牢固,罗丹明B不易从蛋白上解离,低温避光储存可稳定保存1年以上,实验过程中信号不易衰减。
使用与保存注意事项
- 密封避光保存在-20℃干燥环境,建议分装储存,避免反复冻融,反复冻融和吸潮会导致蛋白聚集变性和荧光淬灭;
- 从冰箱取出后需回温至室温再开盖,避免水汽进入导致吸潮结块;
- 罗丹明B存在一定光敏性,配制工作液和实验操作过程中尽量避光,现配现用,剩余工作液避光冻存,避免长时间强光照射;
- 本产品仅用于体外科研实验,禁止用于人体临床治疗、食品或化妆品生产。
温馨提示:供应产品仅用于科研,不能用于人体!
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