Adv Sci | 黄建东/钟亦琛/邱宗祥联合团队与贝湾生物合作开发用于精准癌症免疫治疗的自组装多肽-佐剂偶联物（SaPAC）平台|t细胞|佐剂|偶联物|免疫治疗|多肽|抗原|癌症|邱宗祥|钟亦琛|黄建东

多肽癌症疫苗长期面临淋巴引流不足、抗原递呈细胞摄取有限和先天免疫激活偏弱等障碍。近日，香港大学李嘉诚医学院黄建东教授、钟亦琛教授、邱宗祥教授与贝湾生物胡叶凡博士联合团队开发了自组装多肽-佐剂偶联物（Self-Assembling Peptide-Adjuvant Conjugate, SaPAC）平台，把新抗原表位与TLR7激动剂共价整合进同一纳米颗粒。相关研究以Self-Assembling Peptide-Adjuvant Conjugate (SaPAC) Platform for Precision Cancer Immunotherapy为题，在线发表于Advanced Science。

多肽靶向特异性好、安全性较明确、生产成本适中，并且可以按表位快速合成，因此适合作为个性化新抗原疫苗。未修饰短肽往往水溶性差、易被蛋白酶降解、体内半衰期短。用在癌症疫苗上会导致一系列问题：抗原难以高效进入引流淋巴结，抗原递呈细胞摄取和加工不足，先天免疫也缺少足够刺激。把多肽和游离佐剂分开给药时，两者在淋巴转运过程中还容易走散。SaPAC解决的是把抗原递送和先天免疫激活固定在同一个化学分子上。

研究内容与发现

位点选择性偶联与纳米自组装。研究团队创新性地提出了模块化的SaPAC平台设计思路。位点选择性共价偶联与纳米颗粒自组装：该平台通过Fmoc固相多肽合成技术，利用位点选择性赖氨酸偶联，将新抗原表位与TLR7激动剂（1V209）共价连接在一起。这些SaPAC偶联物能够在水化条件下自组装成直径约为100-200 nm的阳离子纳米颗粒。

图1 SaPAC的分子设计与自组装。上为不含共价佐剂的SaPN-OVA，下为在赖氨酸侧链连接1V209后的SaPAC-OVA；右侧为两种纳米颗粒的透射电镜图像。标尺所示形态为干燥状态下的颗粒，水合粒径约100–200 nm。

淋巴结滞留、交叉提呈与T细胞启动。与未偶联佐剂的自组装多肽纳米颗粒和游离佐剂的物理混合物相比，SaPAC纳米颗粒显著增强了淋巴引流效率，并延长了抗原在引流淋巴结中的持续留存时间。机制研究证实，SaPAC能够有效激活TLR7-MyD88信号轴，并促进浆细胞样树突状细胞（pDC）和巨噬细胞的招募。此外，它能强效驱动APC的成熟，表现为CD80+CD86+双阳性细胞比例显著增加，同时增强MHC-I类分子的交叉递呈，从而大幅放大抗原特异性CD8+ T细胞的启动过程。转录组学分析和MyD88基因敲除小鼠模型进一步验证了其免疫原性高度依赖于TLR-MyD88依赖的先天免疫激活。

单药抗肿瘤作用。在皮下B16-OVA黑色素瘤中，SaPAC-OVA单药抑制肿瘤生长，并增加瘤内活化CD8+ T细胞和NK细胞浸润。换成实验室筛选的MB49膀胱癌新抗原后，SaPAC-MB49在第15天把终点瘤体积压到200 mm³以下，与Poly(I:C)佐剂基准相当，未偶联对照获益有限。文中Poly(I:C)是常用阳性基准，主要经TLR3和MDA5发挥作用。

冷肿瘤中与抗PD-1联用。原位4T1三阴性乳腺癌的免疫抑制更强。团队从突变肽中筛选出4T1、4T1和4T1，制成三价triSaPAC-4T1；对应野生型肽未显示交叉免疫原性。三价SaPAC与抗PD-1联用后，肿瘤从第9天起持续受到抑制，终点体积与Poly(I:C)佐剂联合抗PD-1的基准相当，且未观察到可检测的系统性毒性。抗PD-1单药对这一模型的肿瘤生长影响有限。

总结与展望

SaPAC是化学组成明确的疫苗平台。皮下给药后，纳米颗粒进入引流淋巴结并被抗原递呈细胞摄取；共价连接的1V209同步刺激TLR7，加工后的新抗原肽呈递给CD8+和CD4+ T细胞。抗原与佐剂因此在同一批细胞里完成先天激活和适应性启动。这一过程见图2。