做mRNA转染实验的小伙伴应该都深有体会，不稳定的转染效率、转染后细胞大量死亡、复杂的操作步骤总是让人头疼不已。我们课题组之前一直使用赛默飞的Lipofectamine MessengerMAX进行mRNA转染，转染效率确实在线，文献认可度也高，但长期用下来缺点也很明显——使用过程中需要频繁换液、实验步骤多、大批量做样本就会耗费很长的时间，而且耗材成本居高不下。因此，我们一直在寻找一款合适的国产平替产品，却始终没有敲定合适的。近期，听其他课题组推荐，我们入手测评了百代生物RFect mRNA转染试剂盒，实测下来整体效果完全超出预期，性价比和实用表现都非常亮眼，在这里和大家分享一波。
先说大家最关心的转染效率问题，这也是衡量一款转染试剂好不好用最核心的标准。课题组之前试用过很多国产转染试剂，最大问题就是重复性差、转染效率忽高忽低。这次测评我们先使用RFect mRNA转染试剂盒转染GFP mRNA到293细胞中做验证，多次重复实验后可以非常直观的看到，RFect mRNA转染试剂盒的转染阳性率能稳定维持在90%以上，荧光视野下阳性细胞分布均匀、覆盖率极高，和MessengerMAX效果几乎持平。后续我们还在Hela、HepG2等细胞上做了重复测试，也都能稳定实现90%以上转染效率，日常实验完全够用。
其次，细胞毒性问题也是影响实验结果的关键因素。为保证转染效率，我们一般会适当增加试剂用量，但这也很容易导致细胞状态崩盘。这一点，之前我们使用MessengerMAX时就深有体会：正常剂量时细胞状态尚可，但调整试剂比例、追求更高转染效率，就很容易出现细胞皱缩、贴壁不牢、甚至批量死亡的问题，容易干扰后续实验结果。而在测评RFect mRNA转染试剂盒时，细胞整体存活状态有了明显的改善，转染后细胞死亡率基本维持在5%，转染24 h镜下观察，细胞贴壁状态良好、形态舒展，几乎没有大面积凋亡漂浮的情况。对我们来说，极低的试剂毒性有效规避了试剂本身带来的实验干扰，让整体实验数据的重复性和可信度都大大提升。
除了稳定高效的转染效率以及低毒的特点，RFect mRNA转染试剂抗血清干扰、全程免换液的优势也非常吸引我。虽然MessengerMAX的官方说明书标明转染过程可免换液，但在实际实验过程中我们发现，该试剂本质上仍属于脂质体类转染试剂，若完全不换液，脂质复合物持续作用很容易引发细胞毒性、造成细胞死亡，因此实操时我们仍会进行换液处理，来保障细胞存活率，但这也导致实验操作变得繁琐、耗时费力，增加了实验出错的风险。而RFect mRNA转染试剂在实际应用中实现了真正的全程无需换液，在常规含血清完全培养基中即可完成转染，在保障细胞存活的同时又极大的简化了实验流程，简直是科研党的福音。
综合下来，对比动辄几千上万的赛默飞进口试剂，百代生物RFect mRNA转染试剂盒兼顾了高转染效率、超低毒性、操作极简三大优势，性能上媲美进口大牌，同时性价比优势突出。不论是日常基础转染、批量样本实验，或是对细胞状态要求高的实验它都能很好适配，是目前我们课题组用过综合体验最好的国产平替，真心推荐各位科研人闭眼尝试。
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