呋喃妥因是一种硝基呋喃类广谱抗生素,过去在水产养殖中常被用来防治细菌性疾病。但是!它在动物体内代谢后产生的1-氨基乙内酰脲(AHD)性质非常稳定,可以长期残留,并且具有潜在的致癌和致突变风险。
正因为如此,包括中国、欧盟、美国在内的全球主要市场都已将其列为违禁药物,明令禁止用于食品动物。开展水产品中呋喃妥因代谢物的检测,是保障食品安全、维护消费者健康的核心环节,也是进出口贸易中必查的强制性项目。
二、快速检测卡的工作原理
快速检测卡采用的是竞争抑制免疫层析技术,听起来很高大上,其实原理并不复杂:
在检测过程中,待测样本中的AHD会与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合
这就会抑制抗体与检测线(T线)上固定的呋喃妥因代谢物偶联物结合
如果样本中AHD含量超过检测限,T线颜色明显浅于质控线(C线)或完全不显色,判为阳性,如果T线颜色与C线相当或更深,则判为阴性,无论结果如何,C线均应显色,否则检测卡无效,简单来说:T线越浅,问题越大!
三、样品前处理步骤
1. 样品制备取鱼、虾等可食肌肉组织,去除脂肪,剪碎或绞碎。
2. 称取与反应称取2g均质样品于50mL离心管中,依次加入:
4mL去离子水,1mL 1M盐酸,适量衍生化试剂,涡旋混匀3分钟,然后在60℃水浴中孵育1小时,使结合态代谢物释放并衍生化。
水产品呋喃妥因代谢物快速检测卡
3. 提取与离心取出后加入5mL提取剂、1mL 1M氢氧化钠、1瓶萃取剂,震荡混匀1分钟。4000转离心5分钟,取上层液3mL至10mL离心管中。
4. 浓缩与复溶在60℃下氮吹或空气吹干。加入1mL正己烷,震荡混匀1分钟,再准确加入500μL样品复溶液,混匀。4000转离心1分钟,取下层水相待测。
四、结果判读:
| 检测线(T线) | 质控线(C线) | 判定结果 | |:---:|:---:|:---:| | 不显色或明显浅于C线 | 显色 |阳性(含违禁药物) | | 颜色与C线相当或更深 | 显色 |阴性(安全合格) | | 任意情况 | 不显色 |检测卡无效|
⚠️ 超过规定判读时间的结果无效,请务必在有效时间内读取!
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