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赵绍祖，字绳伯，号琴士，安徽泾县人。 他幼年聪慧过人，九岁就以“能文”著称。二十岁的时候去参加重子试，凭经解的本事夺冠。此时，受到一代儒宗朱筠的赏识，被荐拔到县学。

朱筠对赵绍祖非常好，手把手地传授他东汉许慎的《说文解字》，并且教诲他"读注疏日毋过十叶，读说文日毋过十字，必精造乃已。"于是赵绍祖的学问大进。但后来他屡试不第，也就对科举仕途心灰意冷了。只是专心致力于经史百家及碑版文献之类的学问。赵绍祖也曾被委派到滕州、广德任训导，但都干不到数月就离开了。他主讲池州秀山、太平翠螺两书院，对弟子殷勤教诱，从不懈怠容。安徽布政使陶澍在当地举孝廉方正，赵绍祖排第一，但他因年老而未去赴任，留在当地，被委派负责编纂《安徽省志》。《安徽省志》前后修了五年，当时的学人都叹为详整有体。

赵绍祖平生没什么爱好，只是喜欢读书研究古代典籍。所著《通鉴注商》是在胡三省的原著基础上又“参研抉发至六百余条”。《通鉴注商》对《资治通鉴》胡三省注在文字、音韵、典章制度、史实考辨、地理阐释等方面的疏漏与谬误作了详细考辨，深入分析了胡氏误注的原因。其文献考辨方法包括追溯史源、考证基础上的分析推论、以金石证史等，且能注意充分借鉴前人成果，取得了较高的学术成就。

他的《新旧唐书互证》“平心以救其失，不挟门户之见也。”其他还有《金石文抄》、《安徽金石略》、《人物志》等。另有诗文，收入《琴士诗抄》中。现录一首《泛舟虹桥》，可见其诗风清新动人之处：“放艇虹桥两桨间，莺歌燕语听间关。绿杨万树刚三月，红榭千家祇一湾。往事销魂惟此水，隔江纵目有层山。蜀冈飞雨飘空翠，湿透春衫未拟还。”

赵绍祖于八十二岁时去世。