1、外植体选取及灭菌

取五小叶槭幼嫩枝条,去除叶片,用体积百分数为75%的酒精处理30s,无菌水清洗1次,再用质量百分数为0.1%的升汞处理6~10min,无菌水清洗3~5次,无菌滤纸吸去水分,剪切成1~2cm的带芽茎段得到外植体

2、初代培养

将得到的外植体接种到初代培养基中进行初代培养,培养过程光照强度为1800lx,光照时间为14 h/d,培养温度为25℃,所述初代培养基组成包括:1/2MS基本培养基,附加0.01 mg/LTDZ,0.1 mg/LNAA,30 g/L蔗糖,6g/L琼脂,初代培养基灭菌前pH为5.5~6.5,诱导生成腋芽。

3、继代培养

将得到的所述腋芽接种到到增殖培养基中进行继代培养,培养过程光照强度为1800lx,光照时间为14 h/d,培养温度为25℃,所述增殖培养基组成包括:NN69基本培养基,附加0.02mg/LTDZ,0.1mg/L6-BA,0.1mg/LNAA,30g/L蔗糖,6g/L琼脂,诱导分化出丛生芽。

4、生根培养

将丛生芽接种到生根培养基中进行生根培养,培养过程光照强度为1800lx,光照时间为14 h/d,培养温度为25℃,所述生根培养基组包括:1/2MS基本培养基,附加0.2 mg/LIBA,20g/L蔗糖,6g/L琼脂,得到生根苗,进行炼苗移栽。