D3胚胎形态学评分的指标,包括卵裂球数目、均一性、胞质碎片等都同可利用囊胚形成显著相关(P<0.05),相对而言,卵裂球数量比卵裂球均一情况及胚胎碎片含量更能预测胚胎的发育潜能,生长速率是评估胚胎潜在活力的有力指标,人类胚胎正常的发育速度是:受精后第1天为2细胞期,第2天为4-6细胞期,第3天为7-9细胞期;因此在D3时,<7细胞胚胎发育较慢,>9细胞胚胎则发育较快。
不同等级D3胚胎发育至囊胚的潜力
以往的常规体外受精-胚胎移植(IFET)治疗中,一般选择受精后D3的卵裂期优质胚胎移植;近年来,随着序贯培养体系的不断完善,囊胚培养变得相对成熟,有研究表明,囊胚培养不仅有利于提高移植周期的临床妊娠率和活产率,同时还可明显降低多胎妊娠的发生率。目前对于很多中心而言,胚胎常规体外培养至D3时,是否行囊胚培养,仍然需要我们根据D3胚胎质量和患者的具体情况作出选择。但究竟什么质量的卵裂期胚胎有更好的囊胚发育潜能,目前还没有定论。
对于卵裂期胚胎质量的评估,目前应用最广泛的是胚形,在受精后(68±1)h观察胚胎,综合比较其卵裂球大小、数目、胞质碎片等参数来评价,我们中心根据这些指标综合评估将D3胚胎分为优质胚胎和非优质胚胎。近来,虽然有观点认为单从D3胚胎的形态来预测胚胎发育潜能不够精确,但我们的研究结果仍然表明通过形态学评分选出的优质胚胎的囊胚形成各项指标都要远高于非优质胚胎(P<0.05);非优质胚胎组的可利用囊胚形成率只有21-39%,这提示我们可以将D3的非优质胚胎进行囊胚培养,以淘汰掉一些发育潜能差的胚胎,在D5或D6再将可利用囊胚进行冷冻,这样可以降低患者的冷冻费用,为患者保存一些更有价值的胚胎。
以往研究表明,D3胚胎为7-9细胞时,囊胚形成率最高,这说明卵裂速度过慢或过快都会对囊胚形成产生影响,但也有文献报道D3卵裂期胚胎卵裂球数>9个的更容易形成囊胚,我们的研究结果表明D3发育较快的胚胎(CP组和>9细胞组)和发育速度正常的胚胎(7-9细胞)相比,囊胚形成的各项指标并没有统计学差异。
有学者通过研究冻融周期中胚胎质量与囊胚形成之间的关系,发现7-细胞与>9细胞胚胎之间囊胚形成率相当,这与我们的研究结果一致,之前普遍认为D3为8细胞阶段的胚胎是理想的移植胚胎,但也有一些研究显示,发育较快的胚胎与8细胞胚胎有同等的临床结局,最近也有学者通过Time-lapsc挑选发育速度较快的胚胎移植,也获得较好的妊娠结局。
胚胎发育过慢,往往预示着发育潜能较低,生长较慢的胚胎异常的发生率比正常的胚明显更高,胚胎质量较差导致移植后的临床妊娠率较低;我们的结果也显示4-6细胞组和<4细胞的囊胚形比例都要远低于>6的胚胎。对于D3发育速度较慢的胚胎,可利用囊胚形成率低,不过仍有部分具有发育至囊胚的潜能,因此在临床工作中,我们需在患者的囊胚培养费用和避免胚胎浪费等方面做出平衡,根据患者的不同情况综合考量这部分胚胎是否要行囊胚培养。
除了卵裂球数目是影响囊胚形成的一个重要因,胚胎碎片与囊胚形成有关,碎片的形成可导致染色体异常,影响囊胚的形成。研究表明,移除碎片可以明显降低IV期胚胎的凋亡指数,有助于优质囊胚的形成。本研究的结果也显示碎片率较高的胚胎继续发育为囊胚及可利用囊胚的能力较低。
D3卵裂球不对称的胚胎囊胚发育潜能要低于卵裂球对称的胚胎(P<0.05),胚胎不对称性的发生可能影响卵裂球细胞骨架的变化趋势和极化,从而影响囊胚的形成,我们的Lv-gisiic显示卵裂球均匀性同可用囊胚形成均显著相关。
D3胚胎质量与囊胚形成密切相关,D3胚胎形态学的各项指标,包括裂数目、均一性及胚胎碎片等均会影响到囊胚的形成及质量,我们可以通过D3胚胎质量预测其囊胚发育潜能,为患者提供最佳的个体化治疗方案。
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