细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代培养。
传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法，贴壁细胞需经消化后才能分瓶，而悬浮型细胞直接分瓶就可以，因为它不贴壁，所以也不需要借助胰蛋白酶消化。
具体过程如下：
1. 取状态良好的细胞，在生物安全柜中操作，用移液管把细胞轻柔吹打均匀。
2. 把细胞悬液转移到15mL离心管中，1000 rpm离心5 min。
3. 轻轻吸去上清后用完全培养基重悬细胞，按照1皿细胞传2皿或3皿比例进行传代，把细胞悬液一分为二或者一分为三后分别转移到新的培养皿中。
4. 接种好的细胞，应在培养皿上标记上细胞名称、细胞代数、传代日期和操作人姓名，轻轻摇匀后转移到37℃、5%CO2培养箱中培养。
5. 细胞培养24h后，根据培养基的颜色及细胞的生长密度进行后续相应的操作（更换新鲜培养基或再次传代处理或进行冻存处理）。
注意事项
1. 把握传代时机，在80%~90%汇合阶段最好，过早传代细胞产量少，过晚细胞健康状态不佳。
2. 注意无菌操作：整个培养过程中保证无菌操作，包括操作前要洗手，进入超净台前要用75%酒精擦拭，试剂等瓶要75%酒精喷浴后才能放入超净台 。
3. 操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。同时不能用手触碰已消毒的工作部分，工作台面上用品布局要合理。
4. 不同细胞、不同操作之间需要换枪头，避免污染。
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