背景:

动脉粥样硬化导致血管变窄,限制血液流动,是心血管疾病的主要原因,占全世界死亡总死亡人数的近三分之一。尽管医疗技术的进步和死亡率的降低,但预计未来死亡总数还会增加,这表明在动脉粥样硬化的临床管理方面需要继续进行技术创新。

基于此,Junbo Ge等人混合生物仿生脂体与血小板膜(P-Lipo)融合,用于动脉粥样硬化靶向(图1)。天然血小板膜和人工脂质膜通过挤出法融合,形成混合纳米球,有望保持血小板和脂质物理化学和药物特性的靶向能力。

P-Lipo的制备和定性

脂质体是由薄膜水化制备的,P-Lipo是通过用挤出法融合血小板膜囊泡(PMV)和脂质体而制造的,拉帕霉素被添加到脂质中,以构建RAP-P-Lipo。脂质体作为药物输送系统的主要限制之一是储存过程中的中度稳定性和聚集风险,这导致需要特殊的储存和递送条件。实验结果表明,血小板膜融合增强了空气中室温下脂体的稳定性,这可能是由于天然抗氧化作用和天然膜上存在的大量表面糖,可能降低储存条件的要求。

P-Lipo定位和渗透作用

P-Lipo的结合和渗透能力通过体外培养脂质体与人颈动脉斑块来评估。人动脉粥样硬化斑块的组织学分析显示,P-Lipo(红色)在斑块组织中广泛积累和更深渗透,而斑块组织中几乎没有Lipo积累,大部分Lipo仅限于斑块边界。这些结果表明,血小板膜装饰可有效增强P-Lipo的斑块分布和渗透。此外,P-Lipo还显示出优于PNP的斑块渗透能力。

P-Lipo定位和生物分布

为了评估P-Lipo在体内动脉粥样硬化的靶向能力,将脂质体静脉注射到ApoE−/−以西式饮食喂养8周的老鼠。与注射P-Lipo的小鼠的正常主动脉相比,P-Lipo优先积聚在动脉粥样硬化斑块处并产生更高的荧光强度,表明P-Lipo特异性靶向动脉粥样硬化斑块。单独的抗体对主动脉瓣切片进行染色,包括 IV 型胶原蛋白、激活内皮细胞的vWF以及巨噬细胞的CD68。结果显示,切片上P-Lipo信号的高度接近或共定位(图4)。这些结果表明,具有天然血小板膜融合的P-Lipo优先分布并渗透到具有多因素生物结合的动脉粥样硬化斑块中。

RAP-P-Lipo抗动脉粥硬化

为了证实P-Lipo制剂在抗动脉粥样硬化治疗中的效用,P-Lipo加入了具有强大动脉粥样硬化保护作用的RAP。负载RAP的脂质体纳米颗粒与其他纳米颗粒相比,显示出优异的抗动脉粥样硬化作用。实验结果表明,RAP-P-Lipo表现出最强的抗动脉粥样硬化功效。显示最小斑块面积和更稳定的斑块,显著减少了主动脉根部的斑块病变和斑块中巨噬细胞阳性面积。这些结果表明,P-Lipo靶向递送RAP通过减弱动脉粥样硬化的发展和稳定动脉粥样硬化斑块,显著增强了RAP的抗动脉粥样硬化作用。

P-Lipo安全性和免疫原性

Q-Lipo的全身给药并未引发小鼠的炎症反应。P-Lipo组和Lipo组血清细胞因子(TNFα、IL-1β和IL-6)水平无显着差异。H&E 染色显示在主要器官中没有观察到明显的组织病理学异常或损伤。此外,IgM和IgG阳性P-Lipo和Lipo的流式细胞术谱没有显示出可观察到的自体抗体滴度升高。这些结果表明,作为靶向递送平台,P-Lipo没有启动显著的适应性免疫反应,对治疗的小鼠没有显著的负面影响,表明P-Lipo治疗动脉粥样硬化的毒性或风险低。

相关成果近期在国际著名期刊Chemical Engineering Journal(2020年影响因子13.273)以题为Biomimetic liposomes hybrid with platelet membranes for targeted therapy of atherosclerosis的论文发表。

论文相关链接:

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1385894720334203