用植物乳杆菌发酵的柠檬皮，具有作为白对虾功能性饲料添加剂的潜力。研究现实在饲料中添加2%的发酵柠檬皮，有助于增强虾的非特异性免疫反应和对溶藻弧菌的抵抗力。
在饲料中添加高达3%的FLP不会影响虾肝胰腺的生长和形态
柠檬是一种重要的柑橘作物，预计2021年全球产量将达到2080万吨（粮农组织，2023 年）。柠檬皮的主要植物化学物质，如：柠檬酸、抗坏血酸、纤维、矿物质、类黄酮、类胡萝卜素、柠檬苦素和精油，可以提供许多有益的健康功效。
本研究旨在评价饲料中添加发酵柠檬皮对虾生长性能、非特异性免疫指标、肝胰腺形态和抗病力的影响。
一、研究方法
1、发酵柠檬皮（FLP）从当地的柠檬汁工厂（台湾屏东）获得，用蒸馏水清洗，切碎，并用NaOH将pH调节至5.5×0.1％NaOH，然后在121℃下高压灭菌15分钟。使用1mL植物乳杆菌和99g柠檬皮，在35℃厌氧条件下同时培养24小时。发酵后，将带有培养基的柠檬皮在50℃的温度下干燥，直至湿度低于10%。FLP的化学成分包括：水分7.66%；粗蛋白7.31%；脂质1.39%；粗纤维13.55%。
2、饲料设计为异氮和异脂的形式，以满足白对虾的营养需求。对照饲料中包含四个水平的FLP：0%、1%、2%和3%。
3、无病（SPF）的白对虾虾苗（PL 15）由Apex Aquaculture Co., Ltd。白对虾在3500升塑料 (FRP) 水箱中适应实验室条件一个月。
二、研究成果
1、成长表现：
各实验组的最终体重、增重率、饲料转化率、蛋白质利用率和成活率均无明显性差异（p>0.05）。本研究强调，白对虾的生长性能不会受到发酵柠檬皮含量高达3%的饲料的影响。
虽然免疫增强功能已被研究证实，但应注意饲料添加剂会抑制鱼类生长，限制了其应用。这项研究表明，植物乳杆菌发酵柠檬皮可用作高达3%的饲料添加剂，而不会对虾的生长性能产生任何负面影响。这也表明FLP适合进一步研究白对虾的有益功能。
表1：添加发酵柠檬皮56天的白对虾生长结果
2、身体构成：
食用1% FLP饲料的虾比饲喂2% FLP饲料的虾具有更高的总体水分。添加2%和3% FLP的虾饲料显示出比添加1% FLP的虾饲料更高的灰分含量。与饲喂1% FLP和3% FLP的虾相比，对照组的全身粗蛋白含量较高。结果表明，全身粗蛋白、水分、灰分含量数值相近：水分为74.47%-76.88%，灰分为2.31%-3.17%，粗蛋白含量为18.21%-19.18%。此外，没有获得一致的趋势或剂量依赖性效应。这表明饲料中添加FLP可能不会影响身体成分。
3、对免疫的影响：
与对照组相比，饲喂1%和2% FLP的虾的总血细胞计数 (THC) 较高，而饲喂2% FLP的虾的酚氧化酶 (PO) 活性较高（图1）。与对照组相比，饲喂含有FLP的虾的总血细胞计数和PO活性有所改善，使用植物乳杆菌FLP对改善白对虾不特异的免疫参数具有有益效果。尽管目前的研究尚未确定哪些植物化学物质和代谢物在虾的免疫系统中发挥作用，但目前的研究确实表明补充FLP对虾的健康有益。
图1. 饲喂不同发酵柠檬皮56天的白对虾的总血细胞计数和酚氧化酶活性。
与对照组相比，在溶藻弧菌攻击后，饲喂2%和3% FLP的虾的存活率更高（图2）。用2%和3% FLP处理的虾比对照组的虾有更好的存活率。
图2：感染溶藻弧菌72小时的对虾存活率
三、结论：
用植物乳杆菌发酵的柠檬皮具有作为白对虾功能性饲料添加剂的潜力。这一结果有助于回收利用农业废物/副产品以实现可持续发展目标。添加高达3%的FLP并不影响虾肝胰腺的生长和形态。
但是，我们建议在虾饲料中添加2% FLP补充剂，以增强受控实验室环境中的非特异性免疫反应和对溶藻弧菌的抵抗力。然而，还需要更多研究了解FLP对水生动物和其他功能性成分的益处。
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