亲爱的研 0 同学们，welcome to 研究生的学术殿堂！初入实验室可能会被各种标准操作、行业黑话搞得迷迷瞪瞪，甚至有倒霉蛋徒手从液氮里捞细胞，弄坏价值百万的显微镜......
但是别担心，为了帮助你们迅速融入实验室生活，快速避坑。
本文将从实验室行（hei）话、常见入门实验、标准溶液制备、仪器使用与维护、实验室安全知识等 5 个方面，为大家提供一份详尽的实验室基础入门指南。
PART-1 实验室黑话 list
研 1 师姐：每天早晨准备一下「泡椒」 的工具，帮师姐配两块胶，陪师姐跑两圈，下午再帮出差的导师写写本子，下班前插 50 盒枪头，一天的放羊研究生生活就圆满结束啦。
你：？？？？
图源：自己做的
实验室是一个充满专业术语的地方。了解这些「黑话」是融入实验室文化的第一步。
实验类
跑胶：进行凝胶电泳实验，跑 PCR 或者跑 WB。
洗瓶子：清洗实验室的玻璃仪器，初入实验室必备技能
柱子：色谱柱，常用于有机化学实验中的分离纯化。
插枪头：更换移液枪的吸头，是实验室常规操作之一。
P 菌：进行细菌的培养和转化，常见于分子生物学实验。
你p不p？：别生气，人家问你 pcr 吗。
生活类
Push：老板催促你加快工作进度。
搬砖：进行日常的科研工作。
写本子：撰写科研项目申请书或研究计划。
投了/中了：文章投稿或被接收。
Accepted：文章被接受发表。
工资：实验室补助，通常指研究生的补助（600）。
身份类
老板：导师，通常在前加大、小二字以区分级别。
大牛：某一领域的顶尖科研人员。
小牛：正在向大牛奋斗的科研工作者。
青椒：青年教师，高校教师中压力较大的群体。
独立 PI：独立的 Principle Investigator，拥有课题组话事权的导师。
土博：本土博士。
放羊：指的是导师基本不管的放养类研究生，实验全凭自觉
PART-2 基础实验手册
养小鼠 C57、Western Blot (WB)、PCR在生物医学研究中扮演着至关重要的角色，是实验室最基础的部分，也是研 0 同学们常接触的实验操作，你需要快速掌握！
实验名称：养小鼠 C57
图源： 自己做的
基础操作步骤：
定期帮师兄师姐清洁消毒笼具并铺设垫料
根据实验需要选择性别、年龄的小鼠并安置
提供饲料和水，建议一周更换 1—2 次
观察小鼠行为和健康状况，记录生长数据
如有繁殖实验，记录繁殖数据和后代信息
实验名称：Western Blot 常规流程
帮师兄师姐配胶（根据实验室的配方表）
提取样本蛋白并进行 SDS-PAGE 电泳将蛋白转到膜上
使用封闭液阻断膜上未结合蛋白的部分
一抗孵育，特异性识别目标蛋白
清洗去除未结合的一抗
二抗孵育，标记一抗
清洗去除未结合的二抗
使用 ECL 试剂进行检测并用成像系统捕捉信号
RT-PCR 电泳实验
设计特异性引物（一般使用文献中验证过的）
准备 PCR 反应体系（模板 DNA、引物、dNTPs、缓冲液、DNA 聚合酶）
设置 PCR 扩增程序（变性、退火、延伸）
进行 PCR 扩增反应
使用凝胶电泳分析 PCR 产物
观察和记录扩增结果
这些步骤是每个实验的基本框架，具体操作时可能还需要根据实验目的和条件进行调整。
后续我们会为大家整理其他高校曾使用过的有效 protocol ，可以作为实验参考。
PART-3 标准溶液配制手册
图源：自己做的
初入实验室，可能会配置 PBS、PBST、TBS、TBST，这也是平时用量最大的几类液体。
它们是许多实验能够顺利进行的关键，也是你立足实验室获得师兄师姐信任的一项技能！以下是详细的配制步骤和单位：
1、PBS (Phosphate Buffered Saline)
浓度：1X PBS
体积：1 升
配方：
- NaCl: 8.00 g
- KCl: 0.20 g
- Na2 HPO4（无水）: 1.42 g
- KH2PO4（无水）: 0.24 g
- 加水至 1000 mL
配制步骤：
1. 称量 8.00 克 NaCl、0.20 克 KCl、1.42 克无水 Na2 HPO4 和 0.24 克无水 KH2PO4。
2. 将这些化学物质放入一个 1000 毫升的容量瓶中。
3. 加入足够的去离子水，使溶液体积接近 1000 毫升。
4. 轻轻搅拌，使所有成分完全溶解。
5. 调整溶液体积至 1000 毫升，确保浓度准确。
2、PBST (Phosphate Buffered Saline with Tween 20)
用途：免疫组织化学染色，减少非特异性结合。
浓度：1X PBST
体积：1 升
配方：
- 1X PBS
- Tween 20: 0.1%（最终浓度）
配制步骤：
1. 按照上述 PBS 的配方配制 1X PBS。
2. 向 1000 毫升 PBS 溶液中加入 1 毫升 Tween 20。
3. 轻轻搅拌，使 Tween 20 完全溶解。
3、TBS (Tris Buffered Saline)
用途：细胞培养和洗涤、免疫组织化学染色等。
浓度：1X TBS
体积：1 升
配方：
- Tris (Trizma base): 6.05 g
- NaCl: 8.77 g
- 加水至 1000 mL
- 调节 pH 至 7.4-7.6
配制步骤：
1. 称量 6.05 克 Tris 和 8.77 克 NaCl。
2. 将这些化学物质放入一个 1000 毫升的容量瓶中。
3. 加入足够的去离子水，使溶液体积接近 1000 毫升。
4. 调节 pH 至 7.4-7.6（使用 pH 计和 Tris 或 HCl）。
5. 调整溶液体积至 1000 毫升，确保浓度准确。
4、TBST (Tris Buffered Saline with Tween 20)
用途：免疫组织化学染色，减少非特异性结合。
浓度：1X TBST
体积：1 升
配方：
- 1X TBS
- Tween 20: 0.1%（最终浓度）
配制步骤：
1. 按照上述 TBS 的配方配制 1X TBS。
2. 向 1000 毫升 TBS 溶液中加入 1 毫升 Tween 20。
3. 轻轻搅拌，使 Tween 20 完全溶解。
注意事项：
- 配制溶液时使用去离子水或蒸馏水。
- 溶液配制完成后应检查 pH 值，确保其在所需范围内。
- 储存时应避免污染和光照，以保持溶液的稳定性。
作为新手小白，配液时要戴好口罩、帽子、眼镜，配液后记得收拾好实验台，并在瓶子上标记好配液日期和 pH 值。
PART-4 仪器使用与维护
正确使用和维护实验室仪器，不仅能够延长仪器的使用寿命，也能确保实验数据的准确性和可靠性。
最重要的是不能给师兄师姐们添麻烦～以下是几个初入实验室阶段常用的实验仪器：
图源：自己做的
仪器名称——离心机
使用注意事项：
1. 确保样品配平，避免离心管不对称放置；2. 选择合适的转子和离心条件；3. 离心结束后，缓慢减速至停止（如果是 4 度离心需要恢复室温并将水擦干净）
仪器名称——PCR 仪
使用注意事项：
1. 使用前预热，确保反应温度准确；2. 严格按照 PCR 程序设置参数；3. 使用专用的 PCR 管和耗材；4. 用完收走你的八连管哦
仪器名称——凝胶成像系统
使用注意事项：
1. 使用前检查光源和相机是否正常；2. 确保凝胶平整放置；3. 避免在强光下长时间暴露凝胶；4. 用完收走你的凝胶哦！
仪器名称——显微镜
使用注意事项：1. 使用前调整光源和物镜；2. 避免长时间观察高倍镜下的样品；3. 使用专用的清洁工具清洁物镜和目镜。
PART-5 实验室安全知识
最后，安全是实验室工作的重中之重，实验室充满了有毒液体、挥发性液体。大部分试剂均有神经毒性。
因此初入实验室一定要了解并遵守实验室安全规则，保护自己和他人的安全。
图源： 自己做的
安全类别——个人防护
1. 穿着合适的实验服，戴好口罩；
2. 处理化学品或生物样本时佩戴手套；
3. 在可能发生飞溅的情况下佩戴护目镜
安全类别——个人防护化学品管理
1. 化学品应按照类别和危险性存储；
2. 所有化学品容器应有清晰的标签；
3. 按照实验室规定处理废弃化学品
安全类别——个人防护生物安全
1. 了解并遵守所在的实验室生物安全规范；
2. 处理生物样本时采取适当防护措施；
3. 按照规定处理生物废弃物，禁止乱丢垃圾。
安全类别——个人防护紧急情况处理
1. 了解实验室内的火灾报警系统和灭火器位置；
2. 掌握基本的火灾扑救方法；
3. 掌握化学品泄漏的应急处理方法。
除了以上常规安全知识外，还要特别注意实验室的水浴锅、高压锅以及液氮罐。
看好水位警戒线，不要随意伸手触碰，心存敬畏才能更安全地做好实验～
初入实验室的你，还有哪些困惑、不解？欢迎追更本系列干货专栏#研 0 入门指南#。
接下来学霸君将继续为大家整理论文检索方法、提前进组的注意事项等内容。
也欢迎大家在评论区留言告诉学霸君你想看的内容哦~
我们长期为科研用户提供前沿资讯、实验方法、选品推荐等服务，并且组建了 70 多个不同领域的专业交流群，覆盖 PCR、WB、蛋白研究、免疫学实验、细胞实验、类器官、外泌体、肿瘤研究等，定期分享实验干货、文献解读、同行分享等活动。
如需进群
可以添加实验菌企微哦
热门跟贴