记忆B细胞（MBC）是体内免疫系统的重要组成部分，能够在再次遇到相同病原体时迅速做出反应，从而提供持续的保护。MBC的产生主要发生在次级淋巴器官中，例如扁桃体、淋巴结和脾脏等。这些器官通过复杂的细胞间相互作用和信号传导，促使初始B细胞活化并分化为MBC或长寿命浆细胞。了解这些细胞的生成、维持和功能对于开发新型疫苗和免疫疗法至关重要。
目前，MBC研究主要依赖于外周血样本。然而，这些样本并不能完全反映MBC在淋巴组织中的行为。随着技术的发展，离体类器官技术为研究提供了新的可能性。类器官是从人体组织中提取的细胞，在三维培养基质中生长和自我组织形成的结构，能够模拟原始器官的功能和特性。
发表在Methods in molecular biology期刊，题为Using Ex Vivo Tonsil Organoids to Study Memory B Cells的文章介绍了一种从人类扁桃体组织中衍生的高通量类器官系统，该系统能够再现许多成功的适应性免疫反应特征，并捕捉个体间对各种刺激物的反应差异。通过这种系统，研究人员能够在完全人类的环境中表征预存抗原特异性MBC，并提供关于MBC动态的宝贵见解。
图示描述：
1) 研究展示了扁桃体组织用于免疫类器官生产的一般工作流程。A部分显示了扁桃体组织的处理策略，从扁桃体组织的机械解离到处理成单细胞悬液，再到长时间的冷冻保存。这一步骤包括使用无菌的剪刀和镊子将组织切割成小块，然后使用细胞解离筛和玻璃杵将其研磨成单细胞悬液。整个解离过程在冰上进行，以保持细胞的活性。解离后的细胞悬液经过100微米尼龙过滤器过滤，去除未完全解离的组织块，最后通过密度梯度离心法分离出活细胞。过滤和离心步骤确保了从扁桃体组织中成功分离和保存高质量的细胞，用于后续的类器官培养和实验。
2) 图中B部分概述了从冷冻保存的扁桃体细胞制备类器官培养的主要步骤。解冻保存的细胞并准备完全的培养基，确保细胞在培养过程中保持最佳活力。研究团队使用了多种培养条件，优化了细胞的刺激和增殖反应。每个类器官培养物中添加了刺激性抗原，以诱导MBC的反应。通过细胞计数和细胞活力检测，研究团队确保了每个样品中细胞的均匀分布和高存活率。此外，通过免疫荧光和流式细胞术等技术，研究人员能够对类器官中的细胞进行详细的表征，分析其在不同刺激条件下的行为。
全文总结：
研究团队开发了一种高通量类器官系统，可以从人类扁桃体组织中高效建立类器官模型。通过优化的解离和培养技术，确保了每个类器官中细胞的高存活率和功能性。类器官保留了原始扁桃体组织的许多特性，包括细胞异质性、组织结构和功能。这使得类器官成为研究免疫反应的理想模型。
类器官系统能够响应多种抗原刺激，模拟人体内的免疫反应。这一特性使得类器官可以用于评估不同疫苗和免疫疗法的效果。通过类器官系统，研究团队能够捕捉不同个体间对抗原的免疫反应差异，为个性化医疗和疫苗开发提供了宝贵数据。
参考文献：
Wagoner ZW, Mitul MT, Wagar LE. Using Ex Vivo Tonsil Organoids to Study Memory B Cells. Methods Mol Biol. 2024;2826:3-13. doi: 10.1007/978-1-0716-3950-4_1. PMID: 39017881.
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