南京博研生物科技有限公司(Byabscience)的小鼠白细胞介素6 (IL-6) ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液等样本中IL-6含量的试剂盒。以下是该试剂盒的说明书概要:
产品名称
小鼠白细胞介素6 (IL-6) ELISA试剂盒
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA)进行定量检测。具体步骤如下:
- 预包被抗体:微孔板上预包被有特异性捕获小鼠IL-6的抗体。
- 样本加入:将待测样本加入微孔板中,样本中的IL-6与预包被抗体结合。
- 洗涤:去除未结合的成分。
- 检测抗体加入:加入酶标记的特异性检测抗体,该抗体与已结合在微孔板上的IL-6结合。
- 再次洗涤:去除未结合的酶标记抗体。
- 底物加入:加入显色底物(TMB),酶催化底物产生蓝色产物。
- 终止液加入:加入终止液,终止反应,蓝色产物变为黄色。
- 读数:在450 nm波长下用酶标仪读取吸光度值。
检测范围
0-1000 pg/mL
样本准备
- 血清:室温静置30分钟,3000 rpm离心10分钟,取上清。
- 血浆:使用EDTA或肝素作为抗凝剂,3000 rpm离心10分钟,取上清。
- 细胞培养上清液:1000 rpm离心5分钟,取上清。
实验步骤
- 准备标准品和样本:按照说明书稀释标准品和样本。
- 加样:将标准品和样本分别加入预包被抗体的微孔板中,每孔100 μL。
- 孵育:室温下避光孵育90分钟。
- 洗涤:用洗涤液洗板5次,每次30秒,最后拍干。
- 加检测抗体:每孔加入100 μL酶标记的检测抗体,室温下避光孵育60分钟。
- 再次洗涤:用洗涤液洗板5次,每次30秒,最后拍干。
- 加底物:每孔加入100 μL TMB底物溶液,室温下避光孵育15分钟。
- 加终止液:每孔加入50 μL终止液,终止反应。
- 读数:在450 nm波长下用酶标仪读取吸光度值。
注意事项
- 安全操作:避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
- 实验环境:实验应在清洁、无尘的环境中进行,避免污染。
- 样本保存:样本应保存在-20°C条件下,避免反复冻融。
- 试剂保存:所有试剂应保存在2-8°C条件下,避免冷冻。
结果计算
- 标准曲线:根据标准品的吸光度值绘制标准曲线。
- 样本浓度:根据标准曲线计算样本中IL-6的浓度。
储存条件
- 试剂盒:2-8°C保存,有效期6个月。
- 标准品:-20°C保存,避免反复冻融。
客户支持
如果您在使用过程中遇到任何问题,建议联系南京博研生物科技有限公司的客户服务部门,获取专业的技术支持和咨询服务。
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