南京博研生物科技有限公司提供的大鼠雌二醇(E2)ELISA试剂盒进行试验的步骤如下:
- 试剂和样本准备:确保所有试剂和样本恢复至室温。
- 标准品稀释:根据说明书,对原倍标准品进行稀释。
- 加样:在酶标包被板上准确加样,包括标准品、待测样本和空白孔。
- 温育:用封板膜封板后,37℃温育30分钟。
- 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复5次。
- 加酶:每孔加入酶标试剂,空白孔除外。
- 再次温育:与步骤4相同的条件进行温育。
- 再次洗涤:与步骤5相同的操作。
- 显色:每孔先加入显色剂A,再加入显色剂B,37℃避光显色15分钟。
- 终止反应:每孔加终止液,终止反应(蓝色变为黄色)。
- 测定:以空白调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
- 结果计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数。
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