沃信VOSHIN07-IIC型紫外交联仪的三种规格灯管详细介绍
254nm波长灯管
254nm波长的紫外线是紫外交联仪中最常用的波长之一。这种波长的紫外线具有较高的能量,能够有效地打断生物分子间的弱键,如氢键,从而促使它们形成新的交联结构。在实验中,科学家会根据具体需求选择合适的紫外交联时间和强度,以确保生物分子间的交联反应在可控的范围内进行。254nm波长的紫外线常用于交联DNA和RNA,以及进行Southern杂交和Northern杂交等实验。
312nm波长灯管
312nm波长的紫外线也是一种常用的波长。与254nm波长相比,312nm波长的紫外光可以减少DNA和RNA的降解,并具有更好的交联效果。此外,312nm波长的紫外光还能降低光损伤、光切割及光二聚体作用的程度,适用于克隆和染色体作图等应用。
365nm波长灯管
365nm波长的紫外线常用于交联DNA、RNA、蛋白质和其他生物分子。这个波长的紫外光照射可以引发光敏反应,从而实现生物分子的交联。在某些情况下,365nm波长的紫外光可以提供比254nm更高的能量,从而更有效地交联分子。
总结
沃信VOSHIN07-IIC型紫外交联仪提供了三种不同波长的灯管,分别是254nm、312nm和365nm。每种波长都有其特定的应用场景和优势,可以根据不同的实验需求和生物分子类型选择合适的波长进行操作。在使用紫外交联仪时,还需要考虑到样本的特性和实验的具体需求,以及采取适当的安全措施,以避免紫外线对人体和环境的伤害。
沃信VOSHIN07-IIC型紫外交联仪 简介
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沃信VOSHIN07 - IIC型紫外交联仪实验报告总结
沃信VOSHIN07 - IIC型紫外交联仪是一种多用途的254nm紫外辐射系统。其工作原理基于紫外线的能量足以刺激核酸和蛋白质中的核酸碱基和氨基酸残基之间的共价键形成,从而实现分子的交联[3]。
二、在不同实验中的应用
(一)分子生物学领域
- DNA和RNA杂交实验
- Southern杂交
- 在Southern杂交实验中,该紫外交联仪用于检测DNA样品中的特定序列。通过紫外线照射使DNA变性并固定在膜上,然后与特定探针杂交,从而分析基因的表达情况。这对研究基因在不同组织、不同发育阶段或不同环境条件下的表达模式有重要意义[2]。
- Northern杂交
- 在RNA研究方面,在Northern杂交中它将RNA固定在膜上以便进行后续杂交和分析,可检测特定RNA分子的表达水平,进而分析基因在转录水平的调控机制[2]。
- 核酸凝胶电泳实验
- 能够固定凝胶中的核酸分子,使其发生化学交联,有助于后续对核酸分子的染色和分析,提高实验的准确性和可靠性[2]。
- CLIP - seq实验(紫外交联免疫沉淀结合高通量测序)
- 基于RNA分子与RNA结合蛋白在254nm紫外照射下发生耦联,以RNA结合蛋白的特异性抗体将RNA -蛋白质复合体沉淀之后,回收其中的RNA片段,经添加接头、RT - PCR等步骤,对这些分子进行高通量测序,再经生物信息学的分析和处理、总结,挖掘出其特定规律,从而深入揭示RNA结合蛋白与RNA分子的调控作用及其对生命的意义[2]。
(二)蛋白质研究领域
- 蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质间相互作用研究
- 可用于研究蛋白质与DNA之间的相互作用,通过交联技术捕获与DNA特异性结合的蛋白质,分析这些蛋白质在基因表达调控中的作用,这对揭示基因表达调控的复杂网络具有重要意义[2]。
(三)微生物学领域
- 微生物突变实验
- 紫外线使DNA双链之间或同一条链上两个相邻的胸腺嘧啶形成聚体,阻碍双链的分开、复制和碱基的正常配对,从而引起突变。可用于研究微生物的诱发突变(诱变),紫外线是一种常用的物理诱变剂[2]。
(四)其他应用
- UV灭菌
- 可用于消除PCR等实验中的污染问题,确保实验结果的准确性,还可用于琼脂糖凝胶中DNA的切割、RecA突变筛选、嘧啶二聚体产生的部分限制性内切酶消化等。在一些设备如美国路阳UCL - 3200/UCL - 3500紫外交联仪可用于Sterilization(灭菌)、DNANicking(DNA缺失)等应用[2]。
- 保障PCR样品安全的前处理
- 例如进行紫外交联以保障PCR样品的安全,还可用于PCR污染消减、UV灭菌消除PCR污染等[3]。
- 聚合物紫外处理
- 在聚合物的处理研究中,发挥紫外处理的作用[3]。
三、仪器特点
- 精确控制
- 微处理器控制,提供精确的UV剂量,LED显示,照射单位可以通过能量(Joules/cm²)或时间来定义[3]。
- 高效固定
- 在核酸相关实验中,可将核酸交联固定在膜上,相比于传统的将膜于80℃真空烘箱中烘2小时的方式,在紫外交联仪254nm紫外光下照射几秒即可,并且紫外照射可使杂交信号比传统烘烤法提高5 - 10倍[3]。
四、实验总结
沃信VOSHIN07 - IIC型紫外交联仪在分子生物学、蛋白质研究、微生物学以及其他多个领域有着广泛的应用。其具有精确控制、高效固定等特点,能够在多种实验中发挥独特的作用,为科研工作者提供了一个多功能、高效的实验工具,有助于深入开展基因表达分析、蛋白质 - 核酸相互作用研究、微生物诱变研究等多项科研工作。
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