在进行超滤实验的过程中,研究人员可能会面临一系列挑战和难题。首先,流速过慢的问题常常导致离心机需要从晚上持续运行到凌晨,这不仅增加了实验人员的工作时长,还可能影响实验进度。其次,浓缩过程的失败会直接影响实验结果,进而增加研究人员的压力。此外,过滤过程中的困难,如PBS难以顺利过滤,也会对实验进度产生不利影响。滤膜的频繁堵塞,尤其是在蛋白换液时超滤管的堵塞,不仅会浪费时间,还可能导致实验进度的延误。最后,蛋白的损失,如离心后蛋白的泄漏,会导致实验结果的不准确,给研究人员带来额外的困扰。这些问题不仅降低了实验的效率,还可能对研究人员的心理状态产生负面影响。
如何根据我的样品体积,选择对应的超滤产品?
选择合适的超滤产品以适应不同样品体积的需求,赛多利斯提供了广泛的超滤产品系列。这些产品能够覆盖从0.1毫升到5升的样品体积,适用于超滤和透析过程。样品处理方式多样,包括离心、加压、加压离心以及切向流过滤(TFF)技术,以满足不同实验条件和需求。
不同的超滤方式有什么特点和区别呢?
常用的是离心方式,过程温和,方便快速,可为大多数样品溶液提供浓缩过滤,用于纯化和浓缩蛋白质、核酸、病毒、大分子和纳米颗粒等
2、Vivaspin 20和Vivaspin 100超滤杯
可以在气体压力下运行,Vivaspin® 20也可以通过加压离心运行,两者相结合的处理时间通常比离心快30 %到50 %
3、Vivaflow 切向流过滤膜包
能够快速处理大体积样品,减少滤膜堵塞,有效回收目标分子。可拓展性强,适用于浓缩、脱盐、澄清和分离等多种操作
超滤膜材质多种多样,都适合我的样品吗,我该如何进行选择呢?
推荐四种膜材质供选择:聚醚砜(PES)、再生纤维素(RC)、改良型再生纤维素(Hydrosart RC)和三醋酸纤维素(CTA)。这些膜材质各有其独特的优势和应用领域,如图所示:
我目前做的是XXX样品,有对应的超滤管供选择吗?
赛多利斯的膜材质和孔径十分齐全,在选型正确的前提下,可以确保任何生物分子的最大回收率!
如何选择最佳的截留分子量(MWCO)呢?
在选择超滤膜时,通常遵循1/3的原则;若截留率是首要考虑因素,可以选择较小的截留分子量(MWCO),比如1/6;若流速更为重要,则可以选择较大的MWCO,如1/2。需要注意的是,不同品牌提供的截留分子量(MWCO)可能存在细微差别,因此在选择时应考虑这些差异,不能一概而论。
我的样品是核酸,如何把单位bp换算成对应的截留分子量KDa呢?
MWCO截留分子量与nm纳米 / bp值的换算关系如图所示。
超滤管使用过程中,对于离心机的摆放有什么要求?
超滤过程中,请注意离心力一定不要作用在膜上,水平转子或角转子的要求也不一样哦,详情请看图示。
使用不同超滤管时的离心力如何设置? 最大处理体积分别是多少?
做实验时需要调整离心力在超滤膜的承受范围内,如果转速太高,可能导致膜破裂。建议在超滤管中加入样品时不要超过最大体积,以赛多利斯的Vivaspin Turbo 15为例,若使用水平转子,样品不得超过15mL,若使用角转子则不超过9mL。
另外,建议核酸样品的离心力比蛋白样品离心力低一半左右。而如果是线性分子,在低的离心力条件下可以获得更好的浓缩效果哦!
热门跟贴