文/华中农业大学陈昌福,武汉科研时代生物技术有限公司 周鑫军
正文/6682字
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陈昌福有话说
最近一段时间,我们经常接到来自吉林、辽宁、河南、安徽等水产养殖区域的水产养殖业者,关于问诊养殖鲤疾病的信息。根据各地水产养殖业者的介绍,可以判定最近这些地方的养殖鲤正在发生的疾病,大都是病毒性疾病。看来,养殖鲤的病毒性疾病,对我国养殖鲤的危害还是比较大的。
当养殖鱼类发病后,相关养殖业者急于找到各种水产用兽药减少患病鱼类死亡的心情,是完全可以理解的。但是,因为现在对于养殖鱼类的病毒性疾病,尚无有效的治疗药物和方法。往往都是治疗疾病的药物用的越多,患病鲤的死亡数量也就越大。
本文内容是力争较为详细地介绍养殖鲤的病毒性疾病特征(希望以此帮助水产养殖业者自己诊断鲤的病毒性疾病)的基础上,提出了预防养殖鲤病毒性疾病的部分可操作措施。
危害养殖鲤的几种
病毒病及其防控方法
摘要:本文在简要介绍养殖鲤(Cyprinus carpio)常见的几种病毒性疾病的特点后,针对病毒性疾病的特点,提出了防控养殖鲤病毒性疾病的方法。
关键词:鲤;病毒病;免疫调节剂;疾病防控;免疫调节
鲤(Cyprinus carpio)是杂食性鱼类。在自然水域环境中栖息苗种阶段的鲤,主要是以浮游动物为食,而成鱼阶段的鲤则以底栖动物、水生植物和其他有机碎屑为食物。因此,鲤的这种天然食性,为人工养殖鲤造就了丰富的饲料来源。
鲤对繁殖环境的要求不苛刻。在有水草的静水环境中,当进入春季、水体温度上升到18℃左右时,鲤即可以开始自然产卵繁殖。雌鱼在浅水区域的植物或碎石上产卵,3~4d后受精卵即可孵化出鲤鱼苗。鲤的生长速度也比较快,3龄鲤即可达到性成熟状态。因此,人工养殖鲤的苗种比较容易获得。
鲤对栖息环境的适应性很强,能够在较低水温和溶氧条件下正常地生存。鲤能够忍受养殖水体中较低的溶氧量,能正常生活的养殖水体温度范围也比较大。因此,在全世界范围内几乎所有淡水水域,鲤均可以生存。
正是因为鲤具有上述生物学习性,现在国内、外对这种淡水鱼类均有较多的养殖,尤其时在我国北方,鲤的人工养殖量是比较大的。
在人工养殖条件下,鲤虽然显示出具有较强的抗病力,但是,也有一些传染性疾病也是会对养殖鲤造成较大的危害的,尤其是一些致病性病毒引起的疾病,往往给养殖鲤造成较大的损失。本文介绍养殖鲤的几种病毒性疾病在我国流行特点的基础上,简要介绍了对养殖鲤病毒病疾病的防控方法。
01
养殖鲤的几种病毒性疾病
1.1鲤春病毒血症(spring viremia of carp,SVC)
SVC养殖鲤的危害,在欧洲、俄罗斯、中东、美国及中国等地均有发生。这种鱼病主要发生于水温12~18℃的春季,死亡率可高达80.0%~90.0%。如果在低水温时期发病,虽然日死亡鱼数量不大,但是,因为死亡持续时间比较长,因此总死亡数量很大。当水温达到18℃以上时,患病鲤几乎不发生死亡。在欧洲,这种疾病主要危害1龄鲤,每年受损鱼总量可达4000t左右,相当于鲤总产量的10.0%左右。从水产养殖经济效益而言,SVC对养殖鲤是属于危害严重的疾病。
导致养殖鲤发生SVC的致病性病毒是鲤弹状病毒(Rhabdovirus carpio),也称为鲤春病毒血症病毒(spring viraemia of carp virus,SVCV)。病毒颗粒呈棒状或子弹状,大小为90.0~180.0nm×60.0~90.0nm,有囊膜。病毒能在鲤性腺、鳔初代细胞、BB、BF-2、EPC、FHM、RTG-2等鱼类细胞株上增殖,并出现细胞病变。
SVC病毒的宿主有很多,病毒可能是通过鳃和肠等两途径感染鱼体。除鲤之外,这种病毒还可以在鲫(Carassius auratus)、鲢(Hypophthalmichthys molitrix)、鳙(Aristichthys nobilis)、草鱼(Ctenopharyngodon idellus)、丁鱥(Tinca tinca)、斜齿鳊(Rutilus rutilus)和圆腹雅罗鱼(Leuciscus idus)等多种鱼类体内发现。不过,SVC对鲤的危害最大。
被感染鲤会避开强水流,变得不活泼,反应迟钝。体色变黑,部分患病鲤眼球突出或因大量腹水而导致腹部膨胀 (图1-1)。但是,有些急性死亡患病鲤,可能看不见上述症状。这种疾病最具特征性 的症状为严重贫血(图1-2)和肌肉点状出血(图1-3)。
图1 患鲤春病毒血症鲤的典型症状
SVC病鱼体色发黑,呼吸缓慢,往往失去平衡而侧游,聚集于出水口。眼球突出,肛门红肿,体表充血、出血,腹部膨大,有多量带血的腹水。由于该病毒在体内增殖,尤其是在毛细血管内皮细胞、造血组织和肾细胞内增殖,从而破坏了体内水盐平衡和正常的血液循环,因此病鱼表现为肝、肾、脾、心、鳔、肌肉和造血组织等多组织器官的水肿、出血、变性、坏死及炎症等病变,从而导致感染鱼死亡。
1.2锦鲤疱疹病毒病(koi herpesvirus disease,KHVD)
1998年,以色列和美国发生了这种疾病。2003年5月,在日本冈山县的河川里发生了这种疾病,造成鲤的大量死亡,这是最先确认的KHVD病例。这种疾病在水温16℃以上时,特别是在20~23℃容易易发。水温在13℃以下或30℃以上时不发病。这种疾病死亡率高,有时可达80.0%以上。目前还未发现除鲤之外的鱼类是否具有易感性。在日本,野生鲤也能发生KHVD,且具有通过水系形成感染链的特点。在河川里放流的观赏鲤中如果混有感染这种疾病的鱼,会加速扩大这种疾病的发病区域。
多数患KHVD的病鱼表现为眼球及头部皮肤凹陷(图1、2)。感染发生后,体表出现斑纹,背鳍似乎重叠。之后,体表分泌大量黏液(图3)。多数病例发生烂鳃(图4),有时候可以检出黄杆菌。内脏未见明显的病 理变化。
图2患锦鲤疱疹病毒病鲤的典型症状
这种疾病由鲤疱疹病毒III型(Cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3)即锦鲤疱疹病毒(koi herpesvirus,KHV)感染所致。该病毒在30℃以上不能增殖。
1.3疱疹病毒性乳头瘤(Herpesviral papilloma)
这种疾病在中世纪的欧洲,被称为鲤痘疮病(皮肤隆起)已被人们认识。日本的锦鲤、真鲤也发生这种疾病。但是,几乎没有因该病致死的情况,患病鱼因外观受损而失去商品或观赏价值。当年鱼也发生该病,但是,这种疾病主要发生于1龄以上的鲤。初夏至盛夏水温升高后,肿瘤组织退化、脱落而自然痊愈的情况较多。
多数病鱼的体表特别是鳍条基部可见白色隆起(图3-1,2)。在组织学检查中可见上皮细胞增生,以及增生的上皮细胞深入结缔组织(图3-3)。病灶部位因上皮增生,若无出血基本上呈白色,并有弹性。内脏各器官没有发现病变,也未发现病变向脏器转移。实验结果表明,用此病毒感染2周龄的仔鱼,死亡率可达60.0%~95.0%;数月后,幸存鱼中肿瘤发生率很高。患病鱼在环境温度升高时肿瘤组织死亡、脱落而痊愈。在实验条件下将形成乳头瘤的鲤(图3-4)放入水温14~20℃的环境后,可见肿瘤退化,经过16d后,所有的供试鱼均可自愈(图3-5)。
图3患疱疹病毒性乳头瘤鲤的典型症状
这种疾病由鲤疱疹病毒I型(Cyprinid herpesvirus I,CyHV-1),也称为鲤疱疹病毒(Carp herpesvirus,CHV)感染所致。CHV虽然是疱疹病毒,但是,与KHV不同。该病毒的感染谱,除鲤之外还不清楚。
耐过鱼的脑组织可中检出该病毒的基因。因此,携带病毒的亲鱼可能传染下一代。另外,从体表脱落的肿瘤组织中也能分离出病毒。因此,这些因素均有可能成为感染源。由于锦鲤通常是活鱼交易,以及将锦鲤拿到评价会上进行展示,故很难断绝病原体和锦鲤的接触。因此,根除这种疾病是比较困难的。
1.4鲤病毒性浮肿病(Viral edema of carp)
1972年,这种疾病在日本广岛和新泻发生以来,锦鲤的这种疾病迅速地蔓延至日本全国。在受精卵孵化后(每年6月)至梅雨结束(7月)期间集中发病,现在该病对养殖锦鲤的危害仍然很大。从秋雨时节发病死亡的病鱼中,以及被称为“昏睡病”的病鱼中分离到了相同的病毒。因此,有人认为这种疾病是由病毒所引起。这种病毒在实验条件下也可导致供试鲤发生与自然状态下相同的疾病,并造成死亡。
患病后的鲤漂游于水面,在池角、岸边以及进水口等处聚集(图4-1)。死亡数量急骤增多,数日可造成全部死亡。病鱼身体浮肿(在尾柄部易判定,呈白色不透明状),眼球凹陷(图4-2),鳃丝棍棒化,有明显粘连现象(图4-3)。另外,有时还伴有体表出血。血液学检查时,表现为红细胞压积上升,血浆渗透压下降,乳酸值上升等。但是,最近发病的表现为,身体浮肿、鳃丝棍棒化及粘连的症状轻微,也不是短时间发生大量死亡,而是多见于1周至10d内逐渐出现死亡。
图4患病毒性浮肿病鲤的典型症状
在鳃上皮细胞内,可见具有260Kbp的双链DNA、类似痘病毒样的病毒(鲤水肿病毒,Carp edema virus,CEV)(图4-4)感染。由于该病毒的感染使鳃上皮细胞增生,呼吸及渗透压调节发生障碍,被认为是造成死亡的病因。
将发病鱼从饲养池取出,用0.6%的食盐水加抗菌药物药浴5~7d可治愈。但是,体型较小的幼鱼较难恢复,通常多在采卵时净化这种疾病。治愈的鱼可能携带病毒,对此应予以注意。另外,池中浮游植物对水质的净化,能抑制这种疾病的发生。
此外,发病池若不采取措施,由于飞鸟等将带毒患病鱼运走而传播病毒,可能导致病情扩大。因此,应用氯制剂对发病池进行彻底消毒。通常认为,此病毒通过亲鱼、成鱼传播。因此,消毒受精卵在防制感染上是有意义的。
1.5病毒性昏睡病(Viral sleeping disease)
1975年,首次确认了这种疾病的发生,而且只有锦鲤发生这种疾病。这种疾病多发于当年鱼,不过有时也发生于1龄以上的成鱼。秋天,从育成池转移到越冬池后的1~2周内发病较多,在低水温进行倒池等操作后比较容易诱发疾病发生。
患病鱼横卧池底如睡觉状。部分患病鱼横卧飘浮于水面(图5-1)。患病鱼初看似已死亡,一旦有声音等刺激便游动,刺激结束后再次横卧。外观上可见体表浮肿,鳍条及体表淤血,眼球凹陷。对病鱼置之不理便会出现死鱼(图5-2)。
图5患病毒性昏睡病鲤的典型症状
这种疾病由和病毒性鲤浮肿病病原相同的痘病毒样病毒感染所致。通常认为在水温、水质变化时移动鱼是这种疾病的诱因。梅雨结束前后,幼鱼期患病毒性浮肿病的锦鲤,有不易发生这种疾病的倾向。由于病毒侵害,鳃上皮细胞的渗透压调节功能障碍,是导致患病鱼死亡的病因。大量飘游鱼波豆虫寄生时也出现类似这种疾病的症状,但是,发生这种疾病的患病鱼几乎没有飘游鱼波豆虫寄生的情况存在。
将水温升至20~25℃,在0.6%~0.7%盐水和抗菌药物水中持续药浴10~14d,对治疗这种疾病有显著疗效。另外,鲤在入越冬池时用0.6%~0.7%盐水浴并加温,然后少量逐渐添加新水冲淡盐水,可预防这种疾病。
上述措施的防病机理在于,高水温可抑制病毒的增殖,提高鲤免疫力,盐水浴可帮助维持鱼体渗透压。因此认为这些措施是有效的。
1.6新开口病Ulcer disease
该病在日本又被称为病毒性出血病伴随开口病(Viremia associated anaaki-byo)。1977年发生于锦鲤,现在日本各地造成了对养殖锦鲤较大的危害。1970~1975年间,发生的开口病,其原发病原为杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida),广泛感染鲤、金鱼、鲫、日本鳗鲡(Anguilla japonica)等淡水鱼。而本新开口病的特征是只发生于锦鲤,另外还发生于韩国养殖的德国镜鲤。
病鱼躯干部、各鳍条基部、口吻部等部位伴有鳞片脱落、出血、溃烂、肌肉外露等形成溃疡灶(图6-1)。患病鱼即使体表病灶很小也能发生死亡。而且不一定能从病灶中分离到病原菌。
病理组织学检查可见,较浅病灶表现为真皮坏死、出血、纤维素沉着,表皮脱落(图6-2)。露出肌肉组织的较深病灶中可见组织坏死、细菌侵染。在病鱼心脏可见心肌细胞变性、坏死(图6-3)。进一步观察还可以发现,肾脏造血组织及脾脏中可见核浓缩、核崩解的大量坏死细胞(图6-4)。
电子显微镜观察可以发现,在真皮疏松结缔组织中的毛细血管内皮细胞、纤维细胞、坏死的造血细胞、脾细胞、心脏细胞的细胞质内可见大量的冠状病毒样粒子。
图6患新开口病鲤的典型症状
这种疾病为冠状病毒样病毒感染所致。病毒感染真皮疏松结缔组织中的毛细血管内皮细胞,导致细胞坏死,损坏真皮结构,形成溃烂病灶。该溃烂病灶被水中的条件致病菌侵染后,溃疡病灶进一步扩大。由病毒感染造血细胞、脾细胞、心肌细胞等,并造成细胞坏死,进而导致患病鱼死亡。该病毒呈球形至洋梨形,表面有明显的棘突样结构。大小为100~170nm(图6-5,箭头)。病毒在受感染细胞内形成特征性的含有晶体结构的包涵体。病毒可用EPC细胞、FHM细胞上培养。培养的病毒经皮内接种可形成溃疡灶。而且,腹腔接种病毒后可导致实验鱼死亡。
尚无有效防制方法。选择对体表病灶内杂菌敏感的药物,并对患病鱼进行肌肉注射,能治愈溃疡。但是有的病鱼在病灶愈合后仍可出现死亡,或者注射抗菌剂后完全不见效果。
02
鲤病毒性疾病的防控方法
对于养殖鲤的各种病毒性疾病,目前尚无有效的治疗方法。可以采用如下措施实施预防。
2.1严格检疫,杜绝将致病性病毒传入新的养殖区域。
2.2对养殖鲤的受精卵进行消毒。可采用有效碘浓度为200.0mg/L的聚乙烯吡咯酮碘、消毒受精卵15min的消毒,可清除受精卵上的病毒。
2.3在有条件的地方,可以通过提高养殖水温的方法,譬如将养殖水温提高到22℃以上,即可控制SVC的发生。
2.4用研制灭活疫苗或弱毒疫苗实施对养殖鲤病毒病的免疫预防。
2.5在疾病流行时间到来之前(每种病毒病都存在发病的适宜水温),可提前14天左右,对养殖鲤定量地投喂免疫调节剂(immunomodulator)。通过调节养殖鲤自身免疫系统的免疫防御功能,实现对危害养殖鲤的病毒性疾病的免疫预防。建议采用安琪酵母股份有限公司生产的酵母细胞壁,作为养殖鲤的免疫调节剂,在每吨饲料中添加8.0~10.0kg,连续投喂28d为一个预防周期,即可有效地预防养殖鲤病毒性疾病的发生与流行。
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编辑:郑燕云
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