检测原理

优品生物的大鼠抗卵清蛋白IgM抗体(OVA IgM)检测试剂盒采用酶联免疫吸附测定（ELISA）技术。该技术通过抗原与抗体的特异性结合，利用酶标记的二抗催化显色反应，从而定量检测样本中的OVA IgM抗体水平。

试剂盒组成

  1. 预包被微孔板：已包被卵清蛋白（OVA）的96孔酶标板，用于捕获样本中的特异性IgM抗体。
  2. 标准品：用于建立标准曲线的OVA IgM标准品。
  3. 检测抗体：HRP标记的二抗，用于信号放大。
  4. 样本稀释液：用于稀释样本。
  5. 洗涤液：用于清洗微孔板。
  6. 显色底物液：TMB显色底物。
  7. 终止液：用于终止显色反应。
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操作步骤

  1. 样本准备：

    1. 收集大鼠的血清或血浆样本，并按照说明书进行稀释和处理。

  2. 加样：

    1. 将处理后的样本和标准品加入预包被的微孔板中，确保每组检测至少包括技术重复。

  3. 孵育：

    1. 在37°C孵育酶标板，通常为1小时，以使OVA特异性IgM抗体与预包被抗原充分结合。

  4. 洗涤：

    1. 使用洗涤液对酶标板进行多次洗涤（通常3-5次），去除未结合的抗体和杂质。

  5. 检测抗体加入：

    1. 在各孔加入酶标记的检测抗体，特异性识别OVA IgM抗体。孵育后再次洗涤酶标板以去除非特异性背景信号。

  6. 显色反应：

    1. 加入显色底物液（如TMB溶液），孵育约10-15分钟后，加入终止液停止反应。

  7. 结果读取：

    1. 在酶标仪上，于450nm波长测定吸光值（A值）。根据标准品的吸光值绘制标准曲线，并对样本中OVA IgM的浓度进行计算。
注意事项
  1. 样本处理：样本稀释比例需严格按照说明书操作，过浓或过稀可能导致检测偏差。
  2. 实验条件：孵育温度和时间需严格控制，避免对实验结果的准确性产生影响。
  3. 洗板步骤：洗涤时注意尽量除去残留物，避免干扰后续显色反应。
  4. 显色时间：显色反应时间应一致，避免过长或过短导致吸光值偏差