儿童肾病综合征常常容易复发,激素减量后病情就反复。过去医生只能依靠大剂量激素试治,很难提前判断患儿会不会复发、是否耐药,也不好筛选适合B细胞靶向治疗的孩子。

浙江大学医学院附属儿童医院毛建华、叶青团队联合深圳亚辉龙在Kidney International杂志发表了题为:Automated chemiluminescence immunoassay for the detection of anti-nephrin autoantibodies的研究,研发出抗nephrin抗体自动化化学发光检测方法,并在儿童肾病队列中证实,该检测可以帮助区分疾病类型、预警复发。

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过去普遍认为儿童特发性肾病综合征,主要是T细胞异常造成。浙大儿院团队早于国外同行开展相关研究: 2021年起,团队发现患儿体内存在多种致病性自身抗体,完善了“T、B细胞共同紊乱,B细胞产生致病抗体损伤肾脏滤过结构”的发病机制。一共找到10种损伤足细胞的自身抗体,部分抗体联合检测的诊断效果优异,借助模型还能预测激素耐药情况。在此基础上,团队在国际上首次定义自身免疫性足细胞病这一新疾病亚型。后续海外多个顶尖研究团队的相关研究,都沿用了这个理论框架。

过去检测抗nephrin抗体的传统方法操作繁琐、结果不稳定,不同医院测出的阳性结果差异大,很难用于日常临床。浙大儿院此前就开发过30分钟完成多抗体同步检测的试剂盒,拿下多项国内外专利,已在多家三甲医院使用。 本次升级的自动化化学发光检测(CLIA),只需要20μL血清,全程仪器自动完成检测。使用经过正确折叠的重组抗原,整套方法的灵敏度、稳定性均达标。检测流程:磁微粒结合抗原→加入患者血清发生抗体结合→标记二抗孵育清洗→仪器发光读数。

研究包含121名肾病患儿、107例疾病对照与40名健康人,新检测和传统方法对比:

1. 和传统检测方法吻合度86.8%,新方法检出阳性比例更高,可以抓到一部分旧方法漏检的低滴度阳性样本。

2. 肾病大量蛋白尿的患儿里,抗体阳性的大多对激素有效,抗体阴性者更容易激素耐药,提示该指标可以辅助预判激素治疗效果。

3. 病情完全好转后:抗体阳性患儿3个月复发风险高达61.5%,阴性仅5.7%;抗体滴度大于35AU/mL的患儿,3个月全部复发;部分病例观察到抗体升高会早于蛋白尿出现,有希望提前预警复发。

该团队完成了“探明发病机制→找到致病靶标→开发检测手段→指导分型治疗”完整研究链条。依托这套研究成果,临床可以减少激素和免疫抑制剂的使用,缩短住院时间,提升难治患儿的治疗效果,相关研究也被国际肾病指南引用。

研究局限:本次是单中心儿童研究,部分组别样本偏少;临界阈值还需要更多多中心研究验证。目前该检测仅作辅助评估,不能单独用来确诊疾病或者直接调整用药,治疗方案需要主治医生综合判断。

原文链接:https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S008525382600788X

制版人:十一

学术合作组织

(*排名不分先后)

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