做过小鼠实验的人都知道，最磨人的往往不是实验设计，而是那些防不胜防的「意外」：
场景一：母鼠吃仔
好不容易等到条件性敲除母鼠产下一窝幼崽，第二天却只剩两只——只因手上残留的消毒剂气味，让母鼠「不认亲崽」，直接吃掉了自己的后代。
场景二：Cre 品系选错
拿到 flox 小鼠后，兴冲冲地配了全身性 Cre 工具鼠，结果发现目的基因在全身被敲除，小鼠胚胎期就死亡了。原来应该选组织特异性 Cre 或诱导型 CreERT2，而不是全身性 Cre。
场景三：PCR 对照缺失的「乌龙」
跑 PCR 鉴定基因敲除小鼠基因型，只跑了样品孔，没设空白对照和阳性对照。结果某些样本出现一条微弱条带，分不清是真实扩增还是气溶胶污染。
那些不起眼的基因工程小鼠繁育与鉴定细节，往往在你毫无防备时，悄悄拖慢整个课题的进度。如果你也曾为此头疼，如果你也想高效筛选品系、避开小鼠吃仔的「雷区」，并掌握 Cre-loxP 系统选择、基因型鉴定技巧等硬核知识。参加药康生物「小鼠答题挑战赛」，既能快速掌握实战技巧，还有机会赢取小爱音响、蓝牙键盘、小米背包、手持风扇等 150 份精美好礼！（答案都在文中 or 品牌日页面内）
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细节决定成败，以下四条实操干货，建议收藏
干货一：母鼠吃仔的「防吃清单」
生产前后三天不换笼：新生仔气味敏感，换笼会破坏熟悉环境，增加母鼠焦虑。
手上别带「异味」：接触母鼠或仔鼠前，用笼内垫料搓一下手套，覆盖外来气味。
补充「月子营养」：每只母鼠每天可喂 1～2 颗瓜子或少量坚果，提高泌乳质量，减少吃仔。
必要时请「代乳」：提前准备母性好的同期哺乳母鼠，将需代乳仔鼠涂抹代乳鼠笼内的垫料或尿液，再放入。
干货二：Cre 工具鼠选型
全身性 Cre：在全身所有组织细胞中表达，若靶基因对发育必需，可能导致胚胎期或围产期死亡。
组织特异性 Cre：仅在特定组织（如肝、脑、T 细胞）表达，适合研究基因在特定器官的功能。
诱导型 Cre（如 CreERT2）：需注射他莫昔芬才入核发挥作用，可实现时空特异性敲除，避免胚胎致死。
干货三：PCR 鉴定必设的三种对照
空白对照（以水代替 DNA 模板）：检测试剂、耗材及环境是否存在核酸污染。若空白出现条带，说明有气溶胶污染。
阴性对照（已知野生型小鼠 DNA）：确认野生型条带大小是否符合预期，并监测扩增特异性。
阳性对照（已知杂合子或纯合子 DNA）：确认 PCR 体系工作正常，避免假阴性。
小提示：三类对照缺一不可，否则出现异常条带时无法快速定位问题，白白浪费时间。
干货四：小鼠常用编号方式「三选一」
断趾法（适用 5～7 日龄幼仔）：剪趾位置在远侧指骨与中侧指骨关节处，用锋利器械减少应激。优点：编号永久清晰；缺点：不适合败血症、关节炎模型或抓力测试等实验。
耳缘打孔法（适用成年小鼠）：左耳代表十位数，右耳代表个位数，用耳标器或手术剪做出缺口。注意：耳朵可能愈合或打架撕裂，需定期检查。
耳标法（适用成年小鼠）：将带数字的耳标打入耳朵，操作最快。注意：耳标易被同笼小鼠咬掉或自行抓掉，需及时补打。
关于药康生物
江苏集萃药康生物科技股份有限公司（科创板代码：688046）是一家专注于实验动物小鼠模型研发、生产及非临床研究服务的国家级高新技术企业，同时是科技部认定的国家遗传工程小鼠资源库共建单位。依托 CRISPR/Cas9、ES 打靶等在内的基因编辑技术，公司建立了国际一流的基因修饰动物模型研发平台，拥有近 3 万种自主知识产权的基因工程小鼠模型品系，其中包括基因敲除/条件性敲除小鼠品系（"斑点鼠计划"）、药靶基因人源化模型、复杂疾病模型、系列免疫缺陷小鼠品系、无菌小鼠品系以及用于抗体药物发现的 NeoMab™ 全人源抗体转基因小鼠，为全球科研机构、CRO 公司及医药企业提供全面的模型资源支持。
内容策划：沈佳钰
内容审核：周育红
题图来源：图虫创意
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