做 Western Blot(WB)实验最头疼的就是转印翻车:条带隐身、背景脏、结果忽好忽坏、重复到崩溃......更何况 WB 实验涉及样本准备、蛋白提取、电泳、转膜、封闭等众多环节,全程 1~2 天的实验,一步出错全白费。
与其在细节里内耗、靠运气赌条带,不如从源头找到真正影响稳定性的因素。为了帮助大家在复杂的 WB 实验中获得更稳定、可靠的结果,Cytiva(思拓凡)推出新品——Cytiva Elite PVDF 转印膜,同时,我们特别发起有奖调研,参与调研,即有机会赢取电动牙刷、折叠键盘、三合一充电线等好礼,1,000 份包邮送 >>
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想告别 WB 玄学,其实关键就在一张好膜。Cytiva Elite PVDF 转印膜,用「膜」法帮你少做重复实验,稳稳出结果。
<碧水悠悠,云影轻软,天光澄澈>
燕语呢喃,草木初萌,处处皆是温柔生机
天地间一派清和,心亦随春光舒展
高灵敏度
低丰度蛋白也能「抓得住」
遇到微量、珍贵样本,蛋白信号弱到看不见?多半是转印效率低、膜抓不住蛋白。Cytiva Elite PVDF 转印膜(简称「Elite PVDF 膜」)在蛋白结合能力与检测灵敏度上做出了显著突破。在相同实验条件下,Elite PVDF 膜能够曝光出低至 7.8 ng 的蛋白条带,展现更高检测灵敏度。对于相同浓度的上样量,信号更强更清晰,低丰度靶标不再「隐身」。
图 1 转铁蛋白 Transferrin 在 Hybond 和 Elite 转印膜的梯度稀释 Western Blot 实验
*使用倍半稀释的转铁蛋白样品进行 Western Blot 实验,实验使用相同的封闭剂、抗体和发光液,保证实验条件完全一致
超低背景
弱条带「自带高光」
高背景像噪音,直接淹没弱条带,判读难、数据不可靠。这时,就要提一个衡量检测质量的「黄金」标准——信噪比。信噪比越高,条带则越清晰。Elite PVDF 膜的优势也正在于此:具有更低的背景信号,从而利于提高信噪比。画面干净通透,弱条带清晰突出,结果好读又可信。
图 2 Hybond 和 Elite 转印膜在不同通道的背景信号
*对两种转印膜分别在 UV、Cy2、Cy5 同时进行 2 S 曝光,获得的图片分析其平均信号值
高度实验稳健性
条件波动依然「稳如磐石」
在 WB 实验中,同样的 protocol,换个不同品牌、型号的转印仪,改个缓冲液配比,甚至换个人操作,结果竟也会「天差地别」,这种不稳定和低可重复性,使得 WB 实验常被科研学子们调侃为「实验玄学」。
Elite PVDF 膜在上市前通过了多场景严苛验证来确保兼容性和实验稳健性。湿转/半干转、不同仪器、不同试剂都兼容,条带清晰、重复性高,实验更省心。
高物理强度与耐剥离性
实现「一膜多检」
WB 实验中,「剥离-再孵育」这一过程更是充满着挑战和不确定性:剥离不彻底会导致残留信号干扰后续结果;剥离过于剧烈则可能损伤膜面结构,导致膜破损或蛋白脱落,使二次孵育失败。
在样本极度珍贵、总量极少的情况下,一张具有高物理强度和耐剥离的转印膜就尤为重要了。Elite PVDF 膜突破性地在物理强度上实现强化,足够适应「剥离-再孵育」流程的严苛考验。剥离后转印膜面无可见抗体残留信号,能够为后续再孵育实验提供干净、可靠的背景。第二次孵育后依然获得清晰锐利、梯度良好的条带信号。
图 3 Hybond 和 Elite 转印膜的剥离—再孵育实验
*使用含有转铁蛋白与 GAPDH 的混合样本进行测试。首次孵育使用转铁蛋白一抗,经二抗孵育并曝光成像后,将膜置于剥离缓冲液中处理,并再次曝光以评估抗体残留情况。随后对同一张膜重新孵育 GAPDH 一抗,再次进行二抗孵育和曝光,观察剥离后和二次孵育抗体后的信号强度。
此外,Elite PVDF 膜还兼容化学发光与荧光 Western Blot 蛋白免疫印迹实验、斑点/狭缝印迹实验等多种技术场景,应用范围广泛。
多位科研 er 参与
首批实测数据 & 反馈新鲜出炉
此前,Cytiva 开展的「膜」法体验活动——新品试用活动已取得阶段性成果。首批测评数据与使用反馈新鲜出炉。
我们邀请了 13 位科研用户从背景干净度、条带清晰度、操作顺手度三个维度进行评分,Elite PVDF 转印膜获测评用户全员高分评价!
以上用户试用反馈表,每个维度最优 5 分,最差 1 分
部分用户实测条带图展示:
膜表现如何?条带返图会说话!
Cytiva 此次以「膜」法升级,为 WB 实验带来更高效的解决方案,致力于让重复实验止于一张好膜。未来 Cytiva 将以持续创新的产品,支持每一份专注,见证每一次突破,以专业,加速每一次蛋白研究!
新品指南
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关于 Cytiva(思拓凡)
Cytiva(思拓凡)是全球生命科学领域的知名解决方案提供商,专注于科研蛋白质研究方向。我们有一系列的产品和解决方案,其中 ÄKTA™、Biacore 和 Hyclone 都是科研界的明星产品,已成为很多实验室的「标配」。
Cytiva 最早源自法玛西亚,后归入 GE 生命科学。现在是丹纳赫集团旗下独立运营公司,和 Leica、Beckman、Abcam 是「兄弟品牌」。
我们的核心价值,在于打通「科研到产业化」的关键链路。学术端,我们覆盖了 985、211 等国内顶尖科研院校和全球头部专家,累计超 10 万用户群体。比如昌平实验室、清华北大等顶尖院校,还有院士专家团队,都在使用我们的方案。产业端,在细胞治疗、基因治疗、抗体等研发领域,超过 90% 以上的专家/企业都选择了 Cytiva 的技术解决方案。头部药企都是我们的长期客户。从实验室的微小突破到惠及全球患者的新药上市,Cytiva 始终以「专业」加速每一次蛋白探索。
内容策划:邹礼平
内容审核:周育红
题图来源:图虫创意
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