1908年11月14日，光绪帝驾崩，享年38岁。20小时后，慈禧太后也死了，享年74岁。两人去世时间就这么相隔短短20小时，难免让人怀疑这是谋害。

究竟是谁对光绪帝下此狠手呢？

有的人说是慈禧太后下的狠手。光绪皇帝4岁登基，由慈禧、慈安两位太后垂帘听政。光绪帝16岁时才亲政，任用康有为变法维新，与慈禧太后结下了梁子，维新变法在慈禧太后和守旧派的百般阻挠下夭折了。百日维新之后光绪帝与慈禧的关系恶化，光绪帝被慈禧软禁了10年。当慈禧知道自己快不行了，她害怕光绪帝重新掌管朝政，她死得不得安宁，光绪一定很讨厌她，她担心死无葬身之地，所以先下手为强，派人将光绪帝杀死。

还有人说杀死光绪帝的是李莲英。李莲英平常仗着慈禧的宠幸，狐假虎威、经常在光绪帝面前嘚瑟，不把他放在眼中，这下树倒弥孙散，李莲英怕万一光绪帝重新掌权，自己被他秋后算账，那只有死路一条了，所以就先下手把光绪帝给毒死了。

还有人说光绪帝是病死的。有学者通过分析光绪帝的病例，发现他自幼多病、身体健康状况很差。而且当时有名医看完光绪帝的病情表示已经是病入膏肓、无药可救。按照脉案的记载，光绪皇帝很有可能是病死的。

末代皇帝溥仪在《我的前半生》中认为是袁世凯毒死溥仪，因为袁世凯在戊戌变法中出卖了光绪帝，他担心光绪帝饶不了他，所以就找机会下药，毒死了光绪帝。

2008年国家清史编纂委员会在北京举行光绪帝死因研究报告会上，宣布调查结果是光绪帝死于砒霜中毒。光绪帝头发砷含量最高处是普通人的2404倍，是同时代隆裕皇后的261倍，证实是中毒身亡的。科学家用其他方式从他身体不同部位进行检测，结果都证实光绪帝生前是被砒霜毒死的。

究竟是谁在背后下这个毒手呢？感觉以上几种说法都有可能，所以众说纷纭，没有定论，也许连光绪帝自己的都不知道，亦或他知道，但是这个答案随着他死亡也成了一个谜。