文 | 黄波

血常规作为最基础的检验项目，除了观察细胞计数的变化，还要对散点图与报警信息有所认知，这样才能及时发现异常、准确发出报告。下面以sysmex-XN2800日常遇到异常WDF、WNR散点图为例，进行分析。

[散点图原理]

采用半导体激光的流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测原理（图1）：全血标本混匀经吸取稀释后，进行荧光染料染色，血细胞悬液里的细胞在鞘流内的试剂包裹下逐个排成一行通过flowcell，以波长633nm激光照射细胞所得到的前向散射光（FSC）、侧向散射光（SSC）、侧向荧光（SFL），将细胞进行计数和分类，图1。

两种散射光（FSC、SSC）反映细胞大小，表面构造、粒子形状、核形态、折射率和反射率等。另外，侧向荧光（SFL）主要反映核酸和细胞器的种类和多少。针对这3种信号（表1），把光信号转化为电脉冲形成散点图，更直观监控仪器工作状态与检测结果图形。

图1

表1

类 型

意 义

FSC

前向散射光

细胞体积大小

SSC

侧向散射光

细胞内部（细胞核、颗粒）

SFL

侧向荧光

细胞中核酸含量、发育成熟度

[背 景]

血细胞分析仪在测试标本中发生WNR和WDF之间存在通道间差，WBC Flag(s)报警（图2）：WBCAbnScattergram白细胞散点图异常、Neutropenia中性粒细胞减少、Lymphopenia淋巴细胞减少、Leukocytopenia白细胞减少。

图2

[分 析]

查看该标本Service界面的通道数据，WNR和WDF之间存在通道间差，WNR通道白细胞结果为1.238，而WDF通道白细胞结果为11.027（图3）。WDF和WNR两通道9段粒子数采样数据较均一，IPU中的采样数据可反应突发的本底干扰，如最大值与最小值之差构成采样数的比率超出规定范围将发生采样错误报警。

WNR通道的WNR-X（SFL侧向荧光，反映细胞核酸含量）散点图灵敏度64.6ch<仪器标准（148±6ch），出现灰区（图4）。WDF通道WDF-Y（SFL侧向荧光，反映细胞核酸含量）散点图灵敏度19.2ch<仪器标准（46±6ch），NE-SSC为161.6ch（正常人分布于140-155ch，当>145±15ch时，反馈出胞浆内颗粒含量的异常），[WBC-D/WBC]比值8.90>正常人比值（1±0.3）（图5）。

图3

图4

图5

推片镜检WNR与WDF通道结果一致，WNR通道出现的异常散点图初步判断是加入染液的量不足未对血细胞未充分染色混匀所致。

为进一步明确故障，检查染液，执行WNR、WDF染液灌注后，测试标本散点图灵敏度问题依旧发生。拆开仪器左侧与背部面板，根据染液液路图查找原因（图6），再次执行各染液灌注时发现WDF（DSV5）、WNR（DSV9）、RET（DSV13）染液至ReactionChambet端管路有气泡且流速缓慢。

图6

经果以上分析和思考，那是什么原因导致染液不能顺利进入混匀室？难道是压力？加染液的原理是通过正负压调控WDF、WNR、RET对应的电磁阀与DP泵进入ReactionChambet。排除WDF、WNR、RET相关电磁阀、管路、DP泵故障。

目标锁定在控制压力的DSV3（0.07Mpa）/DSV4（-0.04Mpa），断开DSV4接头，测试没有负压经过，沿着管路找到第一个连接的三通接头时发现已经被结晶堵塞（图7），所以导致负压不能通过DSV4控制DP泵抽吸各染液。清洁该三通接头，接通管路，进行各染液灌注，新鲜血标本测试，散点图灵敏度正常（图8），符合仪器质量标准（图9）。

图7

图8

图9

[总 结]

该案例感触很深，在血常规检测中观察散点图的认知度要高。虽然仪器的自身优势给工作人员提供了帮助，但是再好的仪器也不能替代推片镜检。只有灵活的运用好专业技术才能为临床发出可信度极高的检测报告，更好精准的为临床、患者服务。

END

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编辑：徐少卿 审校：陈雪礼