门冬氨酸鸟氨酸发酵需要使用一些好氧菌种,在好氧菌种的作用下,生产发酵过程中会出现大量的泡沫,这些泡沫的存在影响发酵效率的同时还会导致一系列的生产问题,例如发酵液溢出导致的车间污染,菌种活动不正常等,这些生产问题会直接影响到生物制药企业的生产效率,并导致直接或间接的损失。

为了解决门冬氨酸鸟氨酸发酵生产的这一问题,最新的发酵工艺是在发酵液中加入少量的消泡剂,从而抑制泡沫的产生,微源检测实验室工程师从事生物制药行业多年,天分享一个方法,不仅仅重视门冬氨酸鸟氨酸中的消泡剂泡敌残留问题,还有助于我们在生产过程中做好消泡剂的残留测定。

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仪器和试剂:高效液相色谱仪 Agilent1260,电子天平XPR205,三氟乙酸,实验室自制水

方法要求和结果:

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供试品溶液制备:取供试品约100mg,精密称定,置于5mL容量瓶中,加入稀释液溶解定容。平行配制2份。

专属性溶液配制对照储备液:称取一定量的消泡剂,置于100mL容量瓶中,加入稀释液溶解并定容至刻度,即得。

线性50%溶液:移取对照储备液0.5mL于20mL容量瓶中,加入稀释液定容至刻度,即得。再依据同样方法得到线性100%溶液及线性200%溶液。

供试品溶液:精密称定门冬氨酸鸟氨酸,置于10mL容量瓶中,加入稀释液溶解定容,即得。

供试品加标溶液:精密称定门冬氨酸鸟氨酸,置于10mL容量瓶中,并加入对照储备液0.5mL,加入稀释液溶解定容,即得。

仪器基线平直后,进空白溶液2针,对照溶液6针,空白溶液1针,线性溶液各1针,空白溶液1针,供试品溶液1针,供试品加标溶液1针,对照溶液1针(回针);空白溶液对消泡剂检测无明显干扰, 6针对照溶液的峰面积RSD≤10%,6针对照溶液加上回针一共7针的消泡剂峰面积RSD≤10%,线性相关系数r≥0.99。供试品加标溶液回收率在80%~120%之间。门冬氨酸鸟氨酸中消泡剂残留检测方法验证结果,符合可接受标准。此方法有较好的专属性和准确度,适用于样品门冬氨酸鸟氨酸中消泡剂(泡敌)的检测。