后生元是继益生菌后出现的一个概念,最早由Tsilingiri等(2012)提出。近些年来,因益生菌活菌难以耐受水产饲料制粒高温,后生元在水产领域愈发受到人们的关注,其在改善消化健康和免疫功能等方面具有重要作用。但是,目前国际上没有公认的后生元定义,各行业对该名词的使用不够规范,因此,本文借由ISAPP对后生元一词的定义、范围等进行了阐述,并结合其在水产养殖中的应用效果,增进相关从业人员对该名词的理解。

01后生元的定义

一种有益于宿主健康的无活性微生物和/或其成分的制剂。“无活性”意味着存在被杀死的微生物,但其功能没有失去。“制剂”是为了反映微生物生物量、基质及其失活方法的特定配方在任何有益效果中发挥作用的可能性。因此,将“后生元”一词用于特定的制剂,其中将包括对微生物、基质和灭活方法的描述,这些微生物、基质和灭活方法共同发挥有益作用。

保留“成分”一词是因为发挥有益作用可能不需要完整的微生物,可能是由微生物细胞成分来发挥作用,包括菌毛、细胞壁成分或其他结构。生长和发酵过程中在特定基质上产生的微生物代谢物或最终产物也算作后生元制剂,但是脱离细胞的纯化代谢产物不属于后生元制剂。此外,要被称之为后生元,必须要确定微生物失活前的组成,因此由未鉴定的微生物生产的制剂不是后生元。目前已有的后生元制剂主要是来自于已经鉴定的芽孢杆菌、酵母菌或乳酸菌。

02后生元研究现状

由图1可以看出,从2007年以后,关于灭活益生菌和无活性益生菌等研究开始崭露头角,而自2013开始,使用后生元一词的研究开始逐渐增多。直到2019年,关于后生元的研究才开始大量出现。在水产领域中,直至2019年,关于后生元的研究才开始出现并在近两年逐渐增多。

■ 图1 已发表文献中“后生元”的使用次数

■ 图2 水产领域中关于后生元的研究

03后生元在水产养殖中的应用

目前已有研究主要包括在虹鳟、南美白对虾和鲟鱼上的研究。目前的研究发现,各种后生元制剂,包括乳酸菌后生元制剂、灭活丁酸梭菌以及酵母代谢物等在提高水产动物的生长性能、增强免疫功能、促进肠道发育以及改善肠道微生物等方面具有重要作用。

根源集团研发团队致力于研发新型后生元产品。针对南美白对虾养殖过程中弧菌爆发等常见问题,我们推出了抑菌型后生元产品-益倍康BL100,同时也推出了在提高生长性能、改善消化健康和免疫功能方面具有重要作用的后生元产品-益倍康YC01,以下是相关内容。

3.1 益倍康BL100

针对抑弧菌及饲料厂添加的需求,根源开发了可在水产饲料中直接添加的抑弧菌产品——益倍康BL100。益倍康BL100是“行业首个以弧菌为靶标菌开发的抑菌型后生元产品”,其核心成分是益生菌的代谢产物,拥有众多产品核心技术。

  • 根源与中国海洋大学合作,通过上百株菌株筛选及代谢产物测验,筛选出强效抑弧菌菌株BL-01;

  • 超200次对发酵底物配方和工艺参数进行测试,实现菌株定向发酵工艺,以弧菌为靶标菌,确保抑弧菌代谢产物分泌最大化;

  • 代谢产物保护工艺,保持代谢产物储存稳定性,耐制粒高温;

3.1.1益倍康BL100抑弧菌效果

抑弧菌效果可以从体内和体外两个维度进行评估,体外评估可分为平板抑菌圈法和最小抑菌浓度(MIC),体内评估可检测对虾肠道及肝胰腺弧菌数量。

(1)平板抑菌圈法

选取益倍康BL100及7种不同的的抑菌产品,包括抗菌肽、酸化剂及代谢产物产品,针对6种常见致病弧菌进行平板抑菌圈试验。针对6种弧菌中的5种益倍康BL100表现出最好的抑菌效果。

■ 表1 益倍康BL100及各竞品平板抑菌圈对比

(2)最小抑菌浓度(MIC)

前期平板抑菌圈试验表明,BL100对弧菌的抑制效果明显好于其它7种竞品,选取平板抑菌效果最好的三个产品进行MIC检测。结果见表2,在4种弧菌中,针对3种弧菌BL100的MIC最低,另一种相同。

■ 表2 益倍康BL100及各竞品MIC对比

3.1.2养殖现场抑弧菌效果

在广东对虾标粗期开展了BL100应用效果试验,产品使用前(6月28日)弧菌数量高于10000 CFU/g,之后每日按0.15 ppm水体剂量拌料投喂BL100代谢产物,虾体弧菌数量连续4天呈逐渐下降趋势,有效抑制率在90%左右。

■ 图3 益倍康BL100对南美白对虾体内弧菌数量的影响

3.1.3耐热性

在试验室条件下对益倍康BL100进行不同条件高温湿热处理,以溶藻弧菌为靶标菌,测定其抑菌效价。益倍康BL100在不同条件湿热处理后,抑菌效价留存率在75%以上。

■ 图4 不同处理方式对益倍康BL 100抑菌能力的影响

3.1.4结论

作为“行业首个以弧菌为靶标菌开发的抑菌型后生元产品”,益倍康BL100专注于水产养殖过程中致病弧菌的抑制,抑菌效果优于市面上抑菌类的产品,同时解决了耐高温的问题,可在水产饲料中直接添加,并在水产饲料企业应用取得了良好的效果,饲料厂可在水产饲料中直接添加,能够减少体内弧菌爆发几率,预防细菌性肠炎的发生,提高养殖成功率。

3.2 益倍康YC01

酵母培养物是由酵母菌在特定的培养基上通过固体深层滚动发酵生产,由酵母细胞外代谢产物、发酵培养基和少量酵母细胞构成。酵母培养物营养物质组成丰富且全面,它所起到的作用是多种营养物质协同作用的结果,近些年来在水产养殖中愈发受到关注。

根源集团在酵母培养物领域深耕多年,目前我们推出了酵母培养物产品-益倍康YC01并在南美白对虾的养殖上探究了其效果,以下是相关内容。

3.2.1生长性能

生长性能结果见表3,与对照相比,0.3%-YC01提高了南美白对虾存活率,0.5%-YC01组存活率高于竞品组。0.5%-YC01组南美白对虾末重和增重率都高于对照组和竞品组。摄食方面,竞品组南美白对虾摄食量最高,但其饵料系数高于0.3%-YC01和0.5%-YC01组,0.5%-YC01组饵料系数最低。

■ 表3 益倍康YC01对南美白对虾生长性能的影响

n=8;同一行的不同字母代表差异显著(P<0.05)。

3.2.2 消化道组织学观察

消化道组织学形态结果见图5和表4。0.5%-YC01组绒毛高度显著高于对照组和竞品组,隐窝深度显著低于对照组和竞品组,且绒毛高度与隐窝深度比值显著高于这两组(P<0.05),表明0.5%-YC01组消化道发育优于对照组和竞品组。

■ 图5 益倍康YC01对南美白对虾消化道形态的影响

■ 表4 益倍康YC01对南美白对虾消化道绒毛高度、隐窝深度及其比值的影响

3.2.3 消化道免疫功能

消化道免疫酶活力见表5。与对照组相比,0.5%-YC01显著提高了南美白对虾消化道酚氧化酶、溶菌酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶活力(P<0.05)。此外,0.5%-YC01组酚氧化酶和酸性磷酸酶活力显著高于竞品组(P<0.05)。这表明益倍康YC01能够通过提高南美白对虾消化道免疫相关酶活力来促进消化道健康。

■ 表5 益倍康YC01对南美白对虾消化道免疫相关酶活力的影响

酚氧化酶:ng/mg·prot;溶菌酶:U/mg·prot;酸性磷酸酶:U/g·prot;碱性磷酸酶:U/g·prot;超氧化物歧化酶;n=6;同一行的不同字母代表差异显著(P<0.05)。

3.2.4结论

(1)饲料中添加0.5%益倍康YC01能够提高南美白对虾增重率、降低饵料系数,相较于对照组提升5.4%和5.3%,且总体效果优于竞品;

(2)0.5%益倍康YC01通过促进肠绒毛发育和增强免疫功能来促进南美白对虾消化道健康,且总体效果优于竞品;

(3)0.5%益倍康YC01通过提高消化道免疫酶活来提高南美白对虾消化道健康。

在水产养殖环境日益复杂的今天,根源集团正在也将一直致力于绿色健康饲料添加剂产品的开发,为生态养殖贡献自己的力量,为人类、地球的健康做援助!