作者 | 唐梦崎

单位 | 成都市青白江区妇幼保健院

前 言

作为一名检验工作者，我们知道血型鉴定在临床上有着及其重要的意义，牵扯到输血安全问题。当血型正定型和反定型结果不一致时，我们查阅病历查看病史，积极寻找原因，通过试管法复核血型，或通过改变反应体系温度（4℃、37℃孵育）、加大血清反应量、进一步做血型血清学补充试验来辅助判断。当发现做完这些仍然无法帮助我们判断ABO血型时，我们还可以通过血型基因检测来明确ABO血型，从而提高血型检验结果的准确性，保障输血的安全性。

案例经过

儿科门诊，男，4岁，一般性医学检查（体检）来做血型鉴定。戴安娜全自动血型分析仪ABO正反定型结果（图1）显示患者正定型为AB型，反定型为B型，正反定型不符。

图1 患者正反定型结果

疑问：正反定型不符合是红细胞问题？血浆问题？或其他？

1、试管法血型复检

难道是患者产生有自身抗体或者同种抗体干扰了反定型结果吗？通过试管法O细胞和自身细胞对照均阴性以及患者当日不规则抗体筛查结果也是阴性排除血浆中有ABO以外的抗体和自身抗体干扰反定型。但试管法血型复核显示正定型A抗原凝集强度为2+，这一抗原减弱现象让我们重新思考难道该患者是一个亚型，A亚B型或者B（A）？

2、血清学补充试验

2.1患者抗-H结果 选取正常O细胞和B细胞做对照，检测患者红细胞上的H抗原，发现患者H抗原弱凝集，凝集强度1+。

2.2患者人源B型血浆结果 选取人源B型血浆（含人源抗-A）与患者红细胞反应，发现两次为阴性不凝集，一次弱凝集（图2）。显微镜镜下观察到弱凝集。（图3）

图2 试管法人源抗-A

图2 显微镜镜下凝集情况

有点似像非像B（A）？因为不能明确血型结果，于是只能建议该患者做ABO血型基因检测。

基因检测结果：该样本经基因测序结果为ABO*AW.41突变型/ABO*B.01。

最终报告结果：AweakB血型，并备注红细胞输注建议用O型，血浆输注建议AB型。

案例分析

通过ABO血型鉴定的判读标准（用符合标准的已知抗-A或抗-B的单克隆抗体检测红细胞，表面相应的抗原凝集强度应≥3+，即正定型反应强度应≥3+；用符合标准的已知抗原的商品化试剂红细胞检测血清中是否有相应的抗体，凝集强度应≥2+，即反定型反应强度应≥2+)[1]，我们得知该患者属于正反定型不符。

我们采用兰炯采等[2]提出的疑难血型样本“三步分析法”来处理，第一步，排除人为因素或操作失误对试验结果的干扰。我们查看仪器是正常运行的，试剂在有效期内的，当日质控也是在控的，立即用盐水试管法复查ABO血型结果；第二步，查看临床资料，发现患者无病史、治疗史、输血移植史等生理病理影响因素；第三步，开始设计针对性试验验证。

在判读微柱凝胶卡结果环节，卡面显示正定型A抗原4+，B抗原4+，我们暂且认为正定型抗原不减弱，正定型是正确的。那么反定型A1孔呈现的弱凝集也就是说属于多出来的（血清额外反应）。导致的原因可能为自身抗体、同种抗体、血清中含有对试剂成分反应的物质、存在有多发性骨髓瘤或高粘滞血症等大分子物质引起的缗钱状形成、输注异型血浆、干细胞移植、使用了免疫球蛋白等。

我们可以通过盐水抗筛或者反定型O细胞对照来发现患者血浆中是否存在不规则抗体。盐水抗筛阳性说明存在盐水反应的不规则抗体，能干扰反定型，盐水抗筛阴性，可能考虑是亚型产生的抗A抗体等。

在ABO亚型鉴定中通常会使用到抗-A1、抗-AB、抗-H、人源抗-A或人源抗-B等。A2、A3、Ax、Am、Aend、CisAB和B(A)这些亚型的红细胞和抗-A1均不凝集，而正常A型及AB型红细胞和抗-A1的凝集强度可以达到4+。抗-AB主要用于鉴定Ax、Bx血型，与抗-A、抗-B相比，抗-AB分别与Ax、Bx型红细胞反应的凝集强度明显较强[3]。

对于非AB型的亚型来说，H抗原强度通常较强，与混合O型及混合B型红细胞比较，亚型H抗原的强度更接近O型红细胞。对于红细胞上的弱A和弱B抗原还可以通过吸收放散试验进行检测[4]。

A亚型主要有A1和A2，占全部A型血的99.9%，其他A亚型（A3、Ax、Aend、Am、Ay和Ael）为数少。

A1B与抗-A1能发生凝集反应，我们可以排除A1B；A2B与抗-A1阴性，与抗-H较弱，与人源B型血浆阳性，不能肯定也不能排除；B（A）与抗-A1一般阴性，少数弱阳性，与抗-H较强，与人源B型血浆阴性，不能肯定也不能排除。

该患者红细胞与人源B型血浆最开始的两次阴性结果让我们差点认为这就是一个B（A）了，可最后一次居然又出现了微凝集，并且该患者的抗-H凝集强度其实并不强，和正常AB型的抗-H凝集强度差不多，而B（A）亚型的凝聚强度按理说应该较强一点。（亚型群的H抗原强度仅次于O型人群，不同ABO红细胞上H抗原数量分布规律为O>A2>B>A1>A2B>A1B）。当不能肯定也不能排除时，我们还是建议做血型基因检测[5]。

什么是B（A）？

B(A）血型是一种罕见的ABO亚型，是正常B型人在遗传给下一代过程中B基因出现突变的一种表现，被认为是遗传学上的B型。变异的B基因与普通的B基因存在一个核苷酸的差异，使得B(A)基因编码的糖基转移酶，既可以催化H抗原变成B抗原，也可以催化H抗原变成A抗原，导致B型红细胞上能表达弱A抗原，因此，在血清学上，除了表现B抗原特异性，同时还表现少量的A抗原特异性。

其特征为与部分单克隆抗-A试剂反应，部分单克隆抗-A试剂不反应。日常检测血型会被误认为是AB型或A2B或A亚B型。血清学反应格局：正定型像AB型，反定型B型，可测得抗-A抗体。使用人源B型血浆（含抗-A抗体）时不会和B(A）红细胞形成凝集,但B(A）亚型的H抗原较AB型的H抗原强许多[6]。

总 结

我们在输血相容性检测工作中会时不时碰到ABO正反定型不符，当我们排除试剂仪器人为技术原因，并设计一系列针对性血清学补充试验仍不能帮助我们确认疑难血型时，我们可以借助分子生物学实验进一步确认，利用血型基因分型来完成最终的一个疑难血型判定。

参考文献：

[1]桂嵘、张志昇、王勇军主编，输血相容性检测及疑难病例分析，人民卫生出版社，2018：22-23，54-56.

[2]兰炯采,陈静娴,马红丽,等.推荐ABO疑难血型三部分析法[J].中国输血杂志,2010,23(3):165-168.

[3]《中国输血杂志》2010年8月第23卷第8期577-579:ABO亚型的检测，DOI：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2010.02.010.。作者：向东（上海市血液中心）

[4]ABO血型正反定型不一致的原因分析及解决策略 任伟;陈惠欣;韩杰;任艳丽; -《临床血液学杂志(输血与检验)》-2016-04-08 0

[5]冯晨晨,陈青.基因检测技术在红细胞血型鉴定中的应用及进展[J].中国输血杂志,2020,33(12):1232-1234.

[6]徐明菊,仇丰武,沈钢,等. B(A)04等位基因的鉴定及相关分子机制[J].中国实验血液学杂志,2023,31(5):1492-1495.

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编辑：徐少卿 审校：陈雪礼