选择体质量250~280 g的清洁级成年雄性Wistar大鼠20只，随机均分为对照组和模型组，每组10只。

动物模型构建与行为评估交流群

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咬合干扰模型制备

具体步骤是取模型组大鼠用3.6%的水合氯醛麻醉（用量1 mL/100 g），用医用棉签蘸水清洁右上第一磨牙并吹干；用格鲁玛酸蚀剂酸蚀20 s，冲洗吹干，保持牙面干燥；在酸蚀面涂配套液体粘接剂，光照20 s固化；最后在牙齿的牙合面及颊腭侧，为了增强树脂的牢固性，树脂延伸到磨牙颊侧、腭侧和近中（注意避免产生悬突），涂格鲁玛流动树脂，树脂高出牙合面约0.5~1 mm，光照20 s固化。用棉签轻触粘结树脂，树脂须稳固不脱落。造模之日起持续观察30 d，造模后第1 d开始每隔1 d检查1次树脂是否稳固（如果脱落，立即重新粘接树脂），同时用von Frey尼龙毛测试咀嚼肌压痛进行鉴定。

Fig1 模型鼠右上第一磨牙咬合干扰口内照片

实验动物:健康雄性SD大鼠40只，初始体重200～220g，饲养环境:24h昼夜交替，室温25℃，自由饮水、饮食，随机分为8组(每组5只):(1)空白对照组:全身麻醉(全麻)下模拟手术操作，右上第一磨牙不粘接任何装置;(2)假干扰组:进行假干扰操作，全麻下于大鼠右上第一磨牙粘接带环，带环不影响咬合;(3)咬合干扰组(不去除组):全麻下于大鼠右上第一磨牙粘接0.2mm厚度金属冠，不去除;(4)2、3、4、5、6d咬合干扰去除组:全麻下于大鼠右上第一磨牙粘接0.2mm厚度金属冠，分别于2、3、4、5、6d去除咬合干扰。空白对照组及假干扰组均为对照组，其余各组为实验组。

大鼠去咬合干扰模型的建立

大鼠经乙醚轻度麻醉后，用藻酸盐制取上颌模型，失蜡法制作大鼠右上第一磨牙镍铬合金铸造冠及带环。金属冠经过打磨、抛光，通过游标卡尺确定其厚度为0.2mm。大鼠以1%(质量分数)戊巴比妥钠腹腔注射全麻后利用树脂粘接剂将金属冠或带环粘固于大鼠右上第一磨牙。于实验设计各时间点(建模后2、3、4、5、6d)以1%(质量分数)戊巴比妥钠全麻下，用尖探针去除金属冠。

各组大鼠于咬合干扰建模前4～6d熟悉环境，测试者对大鼠进行安抚，每天30min。分别于建模前1～3d及建模后1、3、5、7、10、14、21、28d，每天固定时间点(9:00am－11:00am)测定大鼠双侧咬肌、颞肌机械刺激反应阈值，每个位点重复测试5次，每次间隔1min，取平均值，并于建模前1d及建模后7d内每日固定时间点测定各组大鼠体重。

咀嚼肌痛觉敏化检测

在大鼠清醒状态下，方法测试大鼠单侧咬肌机械刺激反应阈值，用von Frey尼龙毛测试咀嚼肌压痛（咬肌的检测点为眼耳连线中点后下1 cm），每一型号von Frey尼龙毛刺激5次。动物出现缩头、避开、抬腿、发出声音等行为被视为有痛觉反应。根据尼龙毛粗细和动物痛觉反应次数，确定痛敏分值，痛敏分值越高表明肌肉对机械压痛越敏感。痛敏分值评分根据von Frey尼龙毛型号调整为：以100 g von Frey尼龙毛有反应的记1分，60 g反应1~2次记2分，60 g反应3次记3分，60 g反应4~5次记4分，26 g有反应记5分。用von Frey尼龙毛测试两组大鼠咀嚼肌压痛，模型组大鼠自造模后第1天起咬肌即出现痛敏分值升高，约7 d后达到高峰，并在以后的咬合干扰观察期间痛敏分值维持高水平。观察期间模型鼠右上第1磨牙颊、腭侧及近中牙龈较对侧同名牙以及邻牙稍红肿，右上第1磨牙颊腭向有些松动，垂直向以及近远中向未见明显松动。有研究方法测试大鼠双侧咬肌及颞肌机械刺激反应阈值。

上颌功能性活动矫治器检测

咀嚼肌生物力学特性

选用4周龄、体重80克左右的Wistar雄性大鼠30只，将受试大鼠随机等量地分为实验组和对照组，自由饮水和定时摄食。自制上颌功能性活动矫治器，引导实验组大鼠下颌作功能性后退，每日白天戴矫治器10－12小时，实验周期为四周。实验结束时，定量评价小动物咀嚼肌生物力学特性的实验技术和方法，检测下颌居于不同位置时，大鼠嚼肌（Masseter Muscle－MM）、二腹肌前腹（Diagastric Muscle－DM）、和翼外肌（Lateral Ptery-goid Musc-le－LPM）等在直接电刺激下的等长主动收缩性质。

TPT：单刺激时，到达最大收缩力的时间。

TPR：单刺激时，从最大张力到完全放松的时间。

Pt1，Pt3，Pt5，Pt10：分别为受不同频率刺激时的最大收缩张力。

PO：最大强直收缩张力。

Fig2 不同开口位置对MM收缩性质的影响

下颌从休息位（切牙间距离3mm）到最大张口位（切牙间距离23mm）实验组与对照组嚼肌收缩性质的变化趋势基本一致，即随切牙间距离的增加，收缩时间逐渐变慢，收缩张力逐渐增强，当切牙间距离为18mm时收缩张力最大。

文献引用：

1.刘存瑞,徐啸翔,曹烨,等.咬合干扰时间因素对大鼠咀嚼肌机械痛觉敏感的影响[J].北京大学学报(医学版),2016,48(01):51-56.

2.宋一平,周秀坤,陈孟诗.功能性矫治器引导下颌后退对大鼠咀嚼肌生物力学特性的影响[J].口腔正畸学,1998,(02):3-6.

3.Mismatch novelty exploration training enhances hippocampal synaptic plasticity: A tool for cognitive stimulation?[J]. M.F. Aidil-Carvalho;;A.J.S. Carmo;;J.A. Ribeiro;;D. Cunha-Reis.Neurobiology of Learning and Memory,2017

4.Inflammatory pain memory facilitates occlusal interference‐induced masticatory muscle hyperalgesia in rats[J]. T‐T. Ding;;X‐X. Xu;;Ye Cao;;C‐R. Liu;;Y‐H. Gan;;Q‐F. Xie.Eur J Pain,2016(3)

5.王云,钱金萍,顾亚茹,等.大鼠三叉神经痛觉传入通路的电生理检测和咬合干扰的影响[J].南方医科大学学报,2019,39(10):1160-1165.

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