一、紧急应对,控制污染扩散
当种子罐出现噬菌体污染时,立即停止接种和发酵操作是至关重要的。这一决策背后有着多方面的关键原因。
首先,接种和发酵操作的持续进行会为噬菌体提供更多的繁殖机会。噬菌体在适宜的环境中能够迅速增殖,若不及时停止操作,其数量将呈指数级增长,导致污染范围急速扩大。
其次,在接种和发酵过程中,微生物的代谢活动和物质交换较为活跃,这为噬菌体的传播创造了有利条件。停止操作能够切断噬菌体借助这些活动扩散的途径。
此外,持续的发酵会产生热量、改变环境的 pH 值等条件,这些变化可能使噬菌体的生存和传播更加有利。而停止操作可以稳定环境条件,减少噬菌体进一步适应和扩散的可能性。
停止接种和发酵操作还能为后续的处理措施争取时间。使得工作人员能够在污染未加剧之前,有条不紊地进行排空、清洁和消毒等工作,提高处理污染的成功率。
总之,立即停止接种和发酵操作是防止噬菌体污染进一步蔓延的关键举措,能够有效控制污染范围,为后续的处理和恢复生产创造有利条件。
二、全面清洁消毒,杀灭噬菌体
种子罐出现噬菌体污染后,排空和深度清洁是关键步骤。首先,排空种子罐内的物质,务必确保无残留。
对于深度清洁,使用过氧化氢溶液或次氯酸钠溶液进行消毒至关重要。
过氧化氢溶液具有强氧化性,能有效破坏噬菌体的结构,杀灭噬菌体及其残留。操作要点如下:
配置合适浓度的过氧化氢溶液,通常为 3%左右。
将溶液充分喷洒或浸泡种子罐内部,确保各个角落都能接触到溶液。
保持作用时间,一般不少于 15 分钟,以保证消毒效果。
次氯酸钠溶液也是常用的消毒剂,其消毒效果显著。操作时需注意:
选择适当浓度的次氯酸钠溶液,如 5%左右。
同样要全面覆盖种子罐内表面,无遗漏区域。
作用时间控制在 30 分钟左右,以充分发挥消毒作用。
在使用这两种消毒剂时,还需注意以下几点:
操作人员应做好防护措施,如佩戴手套、口罩等,避免直接接触溶液对身体造成伤害。
消毒完成后,要用大量清水冲洗种子罐,以去除残留的消毒剂,防止对后续操作产生影响。
通过正确的排空和深度清洁,使用过氧化氢溶液或次氯酸钠溶液进行彻底消毒,可以最大程度地杀灭噬菌体,为种子罐的重新使用创造安全卫生的环境。
三、强化环境监测消毒,杜绝再次污染
(一)加强种子罐周边环境监测和消毒的意义
加强种子罐周边环境的监测和消毒对于防止噬菌体再次污染至关重要。首先,噬菌体可能存在于空气、设备表面、操作工具等周边环境中,若不进行监测和消毒,容易重新污染处理后的种子罐。其次,环境中的噬菌体可能会不断变异和增殖,增加污染的复杂性和严重性。定期监测和消毒能够及时发现并清除潜在的噬菌体污染源,降低再次污染的风险,为种子罐的安全运行提供有力保障。
(二)定期对种子罐进行噬菌体检测的频率
通常情况下,建议每周对种子罐进行至少一次噬菌体检测。在生产高峰期或环境噬菌体污染风险较高时,应适当提高检测频率,如每 3-4 天检测一次。对于新启用的种子罐或经历过噬菌体污染处理后的种子罐,在恢复生产后的前两周内,最好每天进行检测,以确保噬菌体被彻底清除,罐内处于无菌状态。
(三)定期对种子罐进行噬菌体检测的方法
目前,常用的噬菌体检测方法包括双层琼脂平板法和离心分离加热法。
双层琼脂平板法:首先倒入下层琼脂培养基(2%,约 10mL/皿)待用。融化上层培养基(1%),冷却至 50 左右时,每管中加入敏感指示菌菌液 0.2mL 混合后立即倒入上述平板铺平。将种子罐中的样品涂抹在平板上,放入恒温培养箱培养,观察是否出现噬菌斑。
离心分离加热法:取种子罐中的培养液,4000rpm 离心 20min,分别取上清液,一部分于分光光度计上测定 OD650 光密度值,另外各取 5mL 上清液于试管中,置沸水浴中煮沸 2min,检测溶液 OD650 光密度值,通过对比判断是否存在噬菌体污染。
通过合理的检测频率和有效的检测方法,能够及时发现噬菌体的存在,确保恢复生产前种子罐内无菌,保障生产的顺利进行。
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(一)食品级杀菌抑菌剂
诺福,它是一种食品级杀菌抑菌剂,具有高效、广谱的杀菌效力,对真菌、霉菌、细菌等杂菌均具有高效杀灭作用。诺福可用于各种洁净室空间和生产设备(罐体、管道)、操作台表面的消毒。诺福特点:
广谱杀菌:能够有效杀灭200多种细菌、病毒和真菌,包括霉菌孢子、细菌芽孢。杀灭黄曲霉菌效果>99.999%。
高效性:可以快速杀灭霉菌,芽孢,作用时间短,效果明显。
稳定性:产品质量稳定,保质期长。
无二次污染:通过释放氢氧键和氧化作用杀菌,残留只有水和氧气,属于无二次污染的纯生态消毒产品。
完全环保:完全生物可分解,对人无害,无腐蚀性,无残留。
(二)大型发酵车间非高温高压灭菌设备系统
欧菲姆智能化人机共存的大型发酵车间常温灭菌技术,代替高温高压灭菌;
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人员友好,安全环保,
常温灭菌方式,非高温高压;
不改变发酵产品本身的质量、口味和颜色;
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