一、紫外交联仪简介及应用
一、分子生物学领域
- DNA和RNA杂交实验
- Southern杂交:用于检测DNA样品中的特定序列,通过紫外线照射使DNA变性并固定在膜上,然后与特定探针杂交,从而分析基因的表达情况,这对研究基因在不同组织、不同发育阶段或不同环境条件下的表达模式有重要意义。
- Northern杂交:在RNA研究中,将RNA固定在膜上以便进行后续杂交和分析,可检测特定RNA分子的表达水平,进而分析基因在转录水平的调控机制。
- 核酸凝胶电泳实验:能够固定凝胶中的核酸分子,使其发生化学交联,有助于后续对核酸分子的染色和分析,提高实验的准确性和可靠性。
- CLIP - seq实验(紫外交联免疫沉淀结合高通量测序):基于RNA分子与RNA结合蛋白在254nm紫外照射下发生耦联,以RNA结合蛋白的特异性抗体将RNA - 蛋白质复合体沉淀之后,回收其中的RNA片段,经添加接头、RT - PCR等步骤,对这些分子进行高通量测序,再经生物信息学的分析和处理、总结,挖掘出其特定规律,从而深入揭示RNA结合蛋白与RNA分子的调控作用及其对生命的意义。
二、蛋白质研究领域
- 蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质间相互作用研究:可用于研究蛋白质与DNA之间的相互作用,通过交联技术捕获与DNA特异性结合的蛋白质,分析这些蛋白质在基因表达调控中的作用,这对揭示基因表达调控的复杂网络具有重要意义。
三、微生物学领域
- 微生物突变实验:紫外线使DNA双链之间或同一条链上两个相邻的胸腺嘧啶形成聚体,阻碍双链的分开、复制和碱基的正常配对,从而引起突变。可用于研究微生物的诱发突变(诱变),紫外线是一种常用的物理诱变剂。
四、其他应用
- UV灭菌:可用于消除PCR等实验中的污染问题,确保实验结果的准确性,还可用于琼脂糖凝胶中DNA的切割、RecA突变筛选、嘧啶二聚体产生的部分限制性内切酶消化等。在一些设备如美国路阳UCL - 3200/UCL - 3500紫外交联仪可用于Sterilization(灭菌)、DNANicking(DNA缺失)等应用。
二、原位杂交仪简介
原位杂交仪是一种专门用于生物学研究的设备,其主要功能在于实现生物样本中特定核酸序列的定位和检测。它的工作原理是利用特定的核酸探针与目标核酸序列进行杂交,进而通过一系列反应揭示出目标核酸在细胞或组织中的分布情况。
VOSHIN-300Y型原位杂交仪产品简介:
原位杂交仪的工作流程详解
- 其他优势
- 全密封式上盖设计保证了理想的温度和湿度,系统保证了高度的温度均一性,使得所有玻片温差上下不超过1℃。
- 玻片很容易用手取出或放入。
- 有三种固定运行模式,数字键盘操作方便易行,显示屏随时显示实验条件,实验过程一目了然。
- 由于集成了(F)ISH处理步骤,减少了大量手工操作时间,避免有害试剂的伤害,无需将12张玻片全部放入也可保持温度均一性,节省试剂、节省人工、节省资金。其薄膜式面板容易清洁。
三、原位杂交仪的应用领域
(一)基因表达研究
可帮助科研人员准确定位基因在细胞或组织中的表达位置,揭示基因与疾病之间的关系,为疾病的治疗和预防提供理论依据。
(二)疾病诊断
- 可用于检测病原体的核酸序列,从而实现对疾病的早期发现和准确诊断。例如可检测感染组织中病毒DNA/RNA的检测和定位,像EB病毒mRNA、人类乳头状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测等。
- 对癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测,可用于某些肿瘤的诊断;还可检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等,应用于遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定等分裂间期细胞遗传学的研究。
(三)药物研发
通过检测药物对基因表达的影响,科研人员可以评估药物的疗效和副作用,为药物的优化和改进提供有力支持。
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