文/华中农业大学陈昌福,武汉科研时代生物技术有限公司 周鑫军

正文/3087字

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陈昌福有话说

最近,因为越冬鱼类的“越冬综合征”在我国华东和华中部分水产养殖区域,已经呈现出来暴发性发生,不少水产养殖业者已经遭受到了一定的经济损失。

越冬鱼类的“越冬综合征”呈现出来的一种主要症状,就是因为越冬鱼类体表存在的创伤处,由养殖水体中常在的水霉菌丝寄生而发生的“水霉病”症状。 “水霉病”就是一种继发性疾病,是因为常在养殖水体中的大量水霉菌孢子,在越冬鱼类体表出现创伤的情况下,才能寄生到鱼体上的一种腐生性真菌。

对于已经寄生到鱼体上的水霉菌丝,至今尚未找到有效的治疗药物。也就是说对于水产养殖动物的水霉病,没有有效药物可以实施治疗。因此,一些水产养殖业者采用的市场上所谓“水霉灵”之类的药物,治疗“越冬综合征”的水霉病症状的越冬鱼类,是不会有实际治疗效果的。

我们完成的这个实验结果说明,实验中的几种消毒剂,预防水产养殖动物的水霉病是有效果的。我们认为,水产养殖动物的水霉病要注重预防。尤其上对于现在正在发生的越冬鱼类“越冬综合征”呈现出来水霉病症状,不要滥用治疗水霉病的一些药物。否则,可能导致雪上加霜的结局。

三种消毒剂对人工感染

泥鳅水霉病的防治效果

摘要:本文内容是报告几种水产用消毒剂对水产养殖动物水霉病的预防与治疗效果。采用从市场上购买的武汉鑫华生环保科技有限公司生产“杀藻剂”,河南新乡康大消毒剂有限公司生产二氧化氯( ClO 2 )以及山西某公司生产的聚维酮碘等三种消毒剂,作为本实验的供试药物。 从患水霉病的鳙(Aristichthys nobilis)体表收集多子水霉菌(Saprolegnia ferax),作为本实验中的感染源。 将泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)人工致伤后作为多子水霉菌的人工感染对象。 将感染源定量投放在盛有养殖池水的塑料水桶中,在放入供试人工致伤泥鳅前4h,放养人工致伤泥鳅的同时,以及放养人工致伤泥鳅后8h,分别在供试塑料桶盛装的养殖池水中投放消毒剂溶液,分别达到0.3mg/L、0.6mg/L和0.9mg/L的终浓度。 实验结果证明,三种供试消毒剂显示出对泥鳅水霉病的良好的预防效果,但是,对已经感染水霉菌丝的受伤泥鳅未能显示出治疗作用。

关键词:水霉病;多子水霉;泥鳅;消毒剂;防控效果

水产养殖动物的水霉病(saprolegnisis),是由多种水生真菌引起的一种常见继发性疾病。过去用于防治养殖鱼类水霉病的药物主要是孔雀石绿和甲醛等。但是,因为有一些研究结果证明,孔雀石绿和甲醛对动物是具有“三致”作用的。因此,寻求对所有动物和养殖环境安全、有效地防治水产养殖动物水霉病的药物,是具有现实意义的课题。

本实验内容是为了验证消毒剂是否对于水产养殖动物的水霉病具有防治效果。以泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)作为实验动物,从患水霉病死亡的鳙(Aristichthys nobilis)体表收集水霉菌丝,感染人工致伤的供试泥鳅,观察了不同种类的水产用消毒剂预防和治疗泥鳅水霉病的效果,现将实验结果报告如下。

01

材料与方法

1.1供试泥鳅及饲养条件

用于本实验的供试泥鳅,是从湖北省武汉市新洲区仓埠镇水产品市场上购买的泥鳅。在每个塑料水桶中盛装5.0L养殖池塘水,于每个塑料水桶内分别放养5尾体长为15.0cm左右的泥鳅。开始实验前将供试泥鳅预备驯养7d,逐尾对供试泥鳅实施检查,淘汰活动异常和有外伤的泥鳅,选择活动正常而无外伤泥鳅作为供试泥鳅。采用解剖刀将供试泥鳅的尾柄两侧刮去部分鳞片并且用纱布擦拭泥鳅身体数次,即人为制造鱼体创伤后(图1),放回塑料水桶中继续饲养。实验期间不投喂饵料,控制水温(12±2)℃。

图1用解剖刀与纱布给供试泥鳅造成体表创伤的情景

1.2供试消毒剂及其药物原液的配制

用于本实验的三种消毒剂,分别是武汉鑫华生环保科技有限公司生产“杀藻剂”,河南新乡康大消毒剂有限公司生产二氧化氯( ClO 2 )以及山西某公司生产的聚维酮碘。 临用前打开包装并准确量取10.0g(mL)溶解于100.0 mL蒸馏水中,摇匀,即为各种消毒剂的供试原液。

1.3水霉菌来源及人工感染的方式

从湖北省武汉市新洲区仓埠金岗村饲养池中,收集体表已经生长出大量多子水霉菌( Saprolegnia ferax),且已经死亡的鳙(图2-左),用解剖刀刮下鳙体表的外菌丝,并切下水霉菌寄生处的部分肌肉,磨碎后连同刮下的水霉菌丝混合在一起,作为感染受伤供试泥鳅的传染源(图2-右),备用。摇动均匀后定量吸取10.0mL水霉菌液,添加在盛有养殖池水的塑料桶中,作为人工感染供试泥鳅水霉病的水霉菌液。

图2示体表附着大量水霉菌丝的死亡鳙(左)和制备的水霉菌丝溶液(右)

1.4供试消毒剂的杀菌作用

取位于武汉市新洲区仓埠街道金岗村的养殖池塘表层水,在容量为250.0mL的玻璃三角瓶中盛装100.0mL养殖池水,将其置于28℃的恒温培养箱中作为杀菌用水。

在每个盛有养殖池水的玻璃三角瓶中,定量添加消毒剂溶液至终浓度分别达到0.3mg/mL(mL/L),0.6mg/L(mL/L)和0.9mg/L(mL/L)。轻摇玻璃三角瓶,使消毒剂原液均匀地分布玻璃三角瓶内养殖池水中。另外分别设置不添消毒剂药液的玻璃三角品作对照组。

在玻璃三角瓶中添加消毒剂药液结束40min后,从各玻璃三角瓶中准确吸取50.0µL养殖池水,塗抹在铺有脑心浸液琼脂(BHIA,Dfico)培养皿中,将制作好的培养皿置于在28℃恒温培养箱中,恒温培养24h后,取出计数各培养皿中的菌落数量。根据培养皿中菌落生成状况,判断消毒剂对养殖池水中可培养细菌的杀菌作用。

1.5供试鱼饲养条件与用药程序与剂量

供试泥鳅的饲养条件如图3所示。将投入供试和对照药物的时间,分为3个不同的时间点,即在塑料水桶中于放养供试人工致伤泥鳅之前的4h,放养供试泥鳅的同时(0h)和放养供试人工致伤泥鳅后8h,分别于每个塑料水桶中定量加入消毒剂药液,添加消毒剂溶液至终浓度分别达到0.3mg/mL(mL/L),0.6mg/L(mL/L)和0.9mg/L(mL/L)。加入消毒剂后轻摇塑料桶,使消毒剂原液均匀地分布塑料桶内养殖池水中。另外分别设置不添消毒剂药液的塑料桶作为对照组(图4)。

1.6防治养殖泥鳅水霉病效果的判定

在对人工感染水霉菌的供试人工致伤泥鳅连续观察18d,每天观察记录供试泥鳅的活动状态与供试泥鳅体表水霉菌着生状况,并记录死亡泥鳅的数量。结合供试泥鳅的死亡数量与水霉菌丝在人工致伤泥鳅体表的着生状况,判断各种消毒剂防治泥鳅水霉病的效果。

02

结果

2.1各种消毒剂对养殖池水中可培养细菌的杀菌效果

各种消毒剂对养殖池水中可培养细菌的杀菌作用见图5所示。由图5所示结果可以看出,三种消毒剂对养殖池水中可培养细菌均显示出一定的杀菌作用。以杀藻剂的杀菌作用最强,当用药浓度为0.3mg/L时,就几乎杀灭了养殖水体中所有可培养细菌, ClO 2 的杀菌效果也很好,在0.9mg/L的浓度条件下,计划杀灭了池水中所有可培养细菌,而聚维酮碘的杀菌效果较差。

图5消毒剂对池水中可培养细菌杀灭作用

注:上排:ClO2;中排:聚维酮碘;下排:杀藻剂

2.2对泥鳅人工感染水霉菌丝的防控效果

供试人工致伤泥鳅在实验期间的出现水霉菌寄生状况如图6所示。由图6所示结果可以看出,在实验开始后的连续观察18d之间,除提前使用消毒剂的实验组供试泥鳅没有出现水霉菌丝寄生的状况外,与感染水霉菌同时用药以及感染8d后再用消毒剂的实验组供试泥鳅均出现了感染水霉菌丝的状况,有些症状严重的供试泥鳅还出现了死亡现象。

图6显示体表出现水霉寄生的濒死泥鳅状况

在放养人工致伤泥鳅前提前4h对养殖池水消毒后的实验组,供试泥鳅体表均为出现水霉菌丝寄生状况,而0h实验组与放养8h后再投放消毒剂的实验组的人工致伤泥鳅体表上,菌出现了不同程度的症状,从供试鱼体表伤口处取水霉菌丝在显微镜下观察,可见有大量水霉菌丝生长(图7)。

图7泥鳅体表水霉菌的显微镜观察状态

03

养殖鱼类的水霉病是由多种水霉菌引起的常见真菌病。较长时期以来,国内外均没有找到能有效治疗养殖鱼类水霉病的药物。本实验采用比较实验的方法,从市场上购买的武汉鑫华生环保科技有限公司生产杀藻剂,河南新乡康大消毒剂有限公司生产二氧化氯(ClO2)以及山西某公司生产的聚维酮碘等三种消毒剂,作为本实验的供试药物,对人工致伤的泥鳅完成了防治水霉病的功效性验证实验。实验结果表明,在实验期间水温变化在(12±2)℃的范围内下,三种消毒剂浓度分别设定在0.3mg/L,0.6mg/L和0.9mg/L的范围内,均显示对养殖水体中可培养细菌有不同程度的杀菌效果。在人工致伤泥鳅接触有水霉菌丝的养殖水体之前4h,对养殖水体采用三种消毒剂消毒水体,均显示出一定的预防水霉病的效果。但是,即使在放养人工致伤泥鳅的同时,对存在有水霉菌丝的养殖水体实施消毒,也难以预防水霉菌丝在体表有伤口人工致伤泥鳅上寄生,供试泥鳅会被水霉菌丝感染。但是,在存在有水霉菌丝的养殖水体放养人工致伤8h后,再采用消毒剂消毒养殖水体,对水霉菌丝感染人工致伤的泥鳅就失去了预防作用。

根据本实验的结果,我们提出的建议是,水产养殖业者采用品质较好的水产用消毒剂预防水产养殖动物的水霉病时,需要提前用药物进行水霉病的预防,对于已经感染水霉菌丝的养殖鱼类,则难以显示出治疗水霉病的效果。

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作者:华中农业大学陈昌福;武汉科研时代生物技术有限公司周鑫军。

编辑:刘弋文

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