日常生活中,塑料无处不在,从包装到建筑材料,从电子产品到汽车部件,它的身影随处可见。然而,随着塑料使用量的急剧增加,塑料污染已成为一个全球性的严峻问题。
PHA 是一类生物聚合物,最著名的是聚羟基丁酸酯(PHB)和聚(3-羟基丁酸酯-co-3-羟基戊酸酯)的共聚物(PHBV)。其由多种原核生物合成并积累为细胞内颗粒,用于储存碳和能量。当细菌处于营养受限的环境时,就会降解积累的 PHA 来维持生长。PHA 有着有很好的生物降解性和生物相容性,可以在海洋、淡水、土壤和垃圾填埋场等多种环境中自然降解,非常适合用作一次性用品和包装材料。
但是,目前 PHA 的大规模应用面临着生产成本高的难题,其中原材料成本,特别是碳源成本占据了总成本的一半以上。因此,寻找低成本的碳源替代食物来源的葡萄糖,成为推动 PHA 工业化生产的关键。
近日,北京化工大学李正军团队发表于 ACS Food Science & Technology 的一篇题为“Efficient Production of Poly-3-hydroxybutyrate by Photobacterium sp. TLY01 Using Hydrolysate of Cassava Powder as the Carbon Source”的研究中,研究人员成功以价格低廉且来源广泛的木薯粉水解液作为碳源,实现了高效生产 PHB,或推动这种环保材料在未来的大规模工业化生产。
为了实现 PHB 生产,研究人员首先需要将木薯粉水解为可发酵糖。以往水解木薯粉获取可发酵糖的方法主要有酸水解和酶水解两种。酸水解虽然能分解木薯粉,但会产生糠醛、5-羟甲基糠醛等抑制物,影响后续的细菌发酵,而直接酶水解的效率较低。为了进一步提高木薯粉的酶解效率,研究团队采用了将酶水解和超声预处理以及低共熔溶剂(DES)预处理相结合的方法。
本次研究所用的木薯粉中淀粉含量为 70.19%,水分和粗纤维含量分别为 13.89% 和 8.12%,蛋白质和灰分所占比例较小。木薯粉经淀粉葡萄糖苷酶水解后,淀粉大量转化为葡萄糖。
超声处理可以通过空化效应产生的剪切力破坏木薯淀粉的颗粒结构,使其表面粗糙并出现裂纹,从而增加酶与底物的接触面积。实验表明,在 55 ℃ 下超声处理 30 分钟,木薯粉糖化率可达 92.01%。而 DES 作为一种由氢键受体(如氯化胆碱)和氢键供体(例如醇或酸)组成的绿色溶剂,能够破坏淀粉的结晶区,降低分子间氢键的稳定性。研究发现,当氯化胆碱与甘油以 1:2 的摩尔比混合时,形成的 DES 预处理效果最佳,木薯粉糖化率提升至 89.07%。不仅如此,通过优化温度(40℃)、处理时间(30 分钟)和固液比(1:10)等预处理条件,糖化效率还进一步得到了提高。
更令人惊喜的是,超声与 DES 的联合使用产生了协同效应。木薯粉经两种方法依次处理后,淀粉颗粒从紧密的球形变为分散的开放结构,酶解效率显著提升。
最终经过预处理的木薯粉糖化率高达 96.92%,生产的葡萄糖浓度达到 29.56 g/L。此外,研究人员发现预处理中的 DES 溶液还可循环使用并回收,更进一步降低了预处理成本。
在获得高浓度葡萄糖后,研究团队利用发光杆菌 Photobacterium sp.TLY01 生产 PHB,这株菌具有广谱碳源利用能力,能够高效积累PHB。
在生物反应器中进行发酵实验时,分批发酵在初始葡萄糖浓度为 80 g/L 的条件下,产生了 25.96 g/L 的 PHB。而补料分批发酵后则进一步提升了 PHB 产量,当初始葡萄糖浓度调整为 40 g/L 时,最终 PHB 产量达到了 64.71 g/L,这是目前以木薯生物质为碳源生产 PHB 的最高报道产量。
可以看到的是,这项研究不仅为 PHB 生产提供了一条低成本路径,也为其他生物基产品的开发提供了借鉴。例如,类似的预处理技术可应用于将低价值非食品产品(如马铃薯和玉米副产品)转化为高价值生物产品。随着合成生物学和绿色化学的进步,相信生物制造有望在减少碳排放、缓解塑料污染方面发挥更大作用。
参考文献:
1.https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acsfoodscitech.5c00165
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