品名:鬼笔环肽-iFluor 647标记(Phalloidin-iFluor 647 Conjugate)
用途:科研
一、产品描述:
鬼笔环肽-iFluor 647标记物是一种高性能荧光探针,专门用于F-肌动蛋白(F-actin)的选择性染色和显微成像。该标记物将具有强烈红外荧光的iFluor 647染料共价连接于天然来源的鬼笔环肽(Phalloidin)分子上,形成稳定、高亲和力的荧光缀合物。其激发/发射波长约为650/665 nm,具有出色的光稳定性和较低的背景信号,适用于共聚焦显微镜和超分辨成像。
二、化学性质:
iFluor 647是一个基于有机氰类结构设计的荧光染料,具备较长波长激发和发射特性,大大减少自体荧光干扰。其分子具有高量子产率、较佳的水溶性和良好的生物相容性。Phalloidin是源自鬼笔菇的七肽环状毒素,具有高度特异性地结合F-actin纤维的能力,并在其活性位点形成稳定复合物,防止其解聚。将iFluor 647通过共价键修饰在Phalloidin分子上,不仅保留了其生物活性,也赋予其荧光可视化能力。
三、制备方法:
iFluor 647标记的鬼笔环肽通常通过NHS酯活化的荧光染料与Phalloidin分子中的伯胺基团发生酰胺键偶联反应制备而成。具体步骤包括:
使用带有活性NHS酯基团的iFluor 647染料作为荧光标记前体;
在pH 7.4–8.5的缓冲条件下,将其与含有游离氨基的鬼笔环肽反应;
通过透析或高效液相色谱(HPLC)纯化除去未反应染料;
浓缩后冻干保存,得到高纯度的Phalloidin-iFluor 647缀合物。该产品通常以DMSO为溶剂提供,并推荐在4°C或-20°C避光保存。
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