师弟

师姐,我用 TRIzol 法提 RNA 真的好痛苦哇!需要反复离心,做一次实验得花几小时,还要用苯酚 / 氯仿这些剧毒试剂。最关键的是,样本都霍霍完了,这提出来的 RNA OD 值还是超标啊!

师姐

用 TRIzol 法是容易导致样本交叉污染,残留的 DNA 可能干扰下游实验结果。要不你试试EZBioscience®RNA 提取试剂盒?我用着挺好的,无需有毒试剂、乙醇沉淀,仅 15 分钟就提取出了 RNA,还配有清除柱一步去除残留基因组 DNA,测出来 RNA 的纯度、浓度都很好,跑胶条带也不错,RNA 完整性都能满足 NGS 建库的要求了!

如果你也为提 RNA 头痛,快来免费试用这款

15 分钟 RNA 提取试剂盒

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该试剂盒采用特殊的样品裂解和洗涤系统,无需苯酚、氯仿抽提等步骤,简单快速,结果稳定。

产品特点:

适用范围广:能够从大部分的动物组织和细胞中提取得到高质量的 RNA;

简单、快速:最少 15 分钟即可获得高质量的 RNA,与 EZB 之前的组织 RNA 提取试剂盒 RN4 等相比,操作更简单快速;

纯度高、完整性高:A260/280 和 A260/230 基本在 2.0 左右,且得到的 RNA 完整性高,能够满足 NGS 测序建库的需要;

安全无毒:不含苯酚等,无需氯仿、异丙醇、DEPC 水等致癌物质,对身体无害;

基因组充分去除:配有 DNA 清除柱,可有效去除 DNA 污染;

所需样品少:最低可提取 5 万细胞或者 1 mg 组织(部分组织)的 RNA。

操作流程:

细胞或者组织通过吹打裂解或者匀浆裂解在裂解液中充分释放 RNA,之后通过裂解产物上 DNA 清除柱、RNA 结合离心吸附柱、洗涤和洗脱这 4 步,即可获得高质量的 RNA,可用于 RT-PCR、RT-qPCR、NGS 建库等实验。

代表性实验结果:

1. 使用本试剂盒分别提取不同细胞数的 A549 细胞以及各种组织的 RNA,提取的 RNA 的浓度、纯度如下表:

2. 琼脂糖凝胶电泳:

细胞样品的 RNA 各取 10 μl,肝、脾、脂肪组织的 RNA 各取 3 μl,心、肾、肺组织的 RNA 各取 10 μl,加 6 μl DNA 上样缓冲液 6× loading buffer 混匀;RNA 上样量为 2~10 μl,电泳电压 180 V,电泳时间 15 min。 M:DL5000 DNA marker;Lane 1、2、3:本试剂盒提取的 200 万、20 万、5 万 A549 细胞 RNA;Lane 4~9:本试剂盒提取的心、肝、肾、脾、肺、脂肪组织 RNA。最终得到琼脂糖凝胶电泳图如下图,结果表明,本试剂盒可从动物组织和细胞中快速提取得到高质量总 RNA,提取的总 RNA 纯度高,完整性好。

3. Agilent 2100 分析:

分别使用 EZB-RN9 提取 20 mg 的心脏组织,10 mg 的肝脏、肾脏组织,和 100 万的 A549 细胞后,取部分 RNA 进行琼脂糖凝胶电泳,及使用 Agilent 2100 生物分析仪进行 RNA 质量分析的结果如图所下示(Sample/Lane 1、2、3、4 分别为:心、肝、肾、细胞):

由上图可见,本试剂盒提取得到的总 RNA 的 RNA 具有优异的完整性,保存完好的动物组织 RNA 的 RIN 值可达 7~8 以上,细胞系 RNA 的 RIN 值可达 9~10,能够较好地满足 NGS 建库测序的要求。

目前正在使用EZBioscience® RNA 提取试剂盒的单位:中科院上海生化细胞所、中科院上海药物所、中科院上海巴斯德所、中科院上海营养与健康所、中科院广州生物健康院、复旦大学、上海交通大学、浙江大学、中山大学、同济大学、华东师范大学、上海科技大学、上海中医药大学、南方医科大学、天津医科大学、广州医科大学、华南农业大学、瑞金医院、中山医院、华山医院、仁济医院、上海红房子医院、复旦附属眼耳鼻喉医院、交大附属六院、交大附属九院、孙逸仙纪念医院、国家儿童医学中心、国家呼吸医学中心等等。

另外,EZBioscience®RNA 提取关联产品如下,欢迎了解选购。

高效快速逆转录试剂盒

A0010CGQ

高效快速彩色 qPCR Mix

A0012-R2

内容审核:沈佳钰

项目审核:朱超敏

题图来源:图虫创意