品名:ReadiUse 预活化 APC-AF700 马来酰亚胺
英文名称:ReadiUse Preactivated APC-AF700 Maleimide
用途:科研
一、基本描述

ReadiUse 预活化 APC-AF700 马来酰亚胺是一种高灵敏度的近红外荧光串联染料标记试剂,将全藻蓝蛋白(Allophycocyanin,APC)与Alexa Fluor® 700染料通过荧光共振能量转移(FRET)技术连接,形成具有激发-发射分离效果的双染料结构。通过进一步引入马来酰亚胺活性基团,该探针可与目标分子的巯基(–SH)形成稳定共价键,实现定向偶联。产品以即用型预活化形式提供,便于在温和条件下快速实现与蛋白、抗体、纳米材料等的共价修饰,是多重流式细胞分析和免疫探针构建的优选工具。
二、化学性质
APC 是一种天然存在于蓝藻和红藻中的荧光蛋白,具有较高的荧光量子产率和水溶性,而Alexa Fluor 700 是一种近红外荧光染料,具备优良的光稳定性和低背景特性。二者结合形成的 APC-AF700 可被 633–640 nm 激发,并在 720 nm 左右发射强荧光信号,适用于近红外通道。
马来酰亚胺基团对巯基具有高度专一性,推荐在 pH 6.5–7.5 缓冲条件下进行偶联反应。反应生成稳定的硫醚键,在体外或体内体系中均表现出较好的生物兼容性和反应效率。整个染料复合物在水性环境中稳定,且不易发生聚集或自发降解。

三、制备方法
ReadiUse 预活化 APC-AF700 马来酰亚胺的制备包括以下主要步骤:

APC提取与纯化:从蓝藻中提取天然APC蛋白,通过凝胶过滤、离子交换等步骤提纯。
染料连接(FRET偶联):利用活化酯或其他共价连接策略将Alexa Fluor 700通过短链交联臂与APC连接,形成高能量转移效率的串联荧光系统。
马来酰亚胺修饰:在APC表面引入马来酰亚胺基团,通常通过修饰赖氨酸残基实现,确保活性基团暴露且具有偶联活性。
纯化与质控:经SEC层析和HPLC去除游离染料和副产物,并通过UV-VIS、SDS-PAGE等方式验证纯度和偶联效率。
溶液稳定化与包装:最终产品以缓冲液形式提供,pH稳定、可长期冷藏保存。
以上资料由小编whl提供,仅用于科研
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