报告内容
黑木耳ACE抑制肽的制备及其构效关系研究
全球每年有近1 000万 人死于高血压。高血压已成为全球重大健康问题,其治疗刻不容缓。血管紧张素转换酶(angiotension converting enzyme,ACE)是血压调节系统中的关键因子,抑制其活性是降压治疗的主要途径,但化学合成ACE抑制剂副作用大。天然来源的ACE抑制肽将受瞩目。黑木耳具有高蛋白的特性,并且具有ACE抑制效果,因此黑木耳是潜在的ACE抑制剂来源。本研究以黑木耳为原料,采用复合酶解法制备ACE抑制肽,结合生物信息学和肽组学技术虚拟筛选多肽序列,人工合成后进行体外ACE抑制活性验证,并分析该多肽与ACE的相互作用力及其抑制动力学,同时探索目标肽对自发性高血压模型大鼠(spontaneous hypertension rats,SHR)的体内降压机制,促进黑木耳蛋白的深层次利用和相关药物研发。
最佳酶解工艺下获得的黑木耳多肽ACE抑制率达到73.67%,利用质谱检测黑木耳蛋白酶解产物冻干粉得到793 条肽段,鉴定得到评分高于0.5且小于20 个氨基酸的序列57 条,肽段C端氨基酸以苯丙氨酸和亮氨酸为主,占比63.16%;经ADMET分析得到4 条较好的多肽,无急性口服毒性、穿过血脑屏障。经分子对接分析,4 条多肽均能与ACE对接成功,与ACE之间均存在氢键。固相合成的P3体外ACE抑制效果接近阳性对照卡托普利。结合Lineweaver-Burk分析,P3对ACE的抑制模式为非竞争性抑制。通过动物实验探索了降压机制:在4 周给药过程中,AAP-M、AAP-H组在慢性抗高血压实验中均显著降低SHRs血压。血压降低伴随着醛固酮和血管紧张素2水平的降低,同时对SHRs心肌组织病理性改变有所改善,使得心肌纤维结构相对更加规则和完整,排列相对整齐。同时,AAP可通过调节益生菌及有害菌的比例和丰度来改善SHR中肠道微生物群的紊乱。
专家介绍
孔祥辉研究员
黑龙江省科学院微生物研究所微生物药物学创新中心
中国菌物学会木耳产业分会 副会长
孔祥辉,博士,黑龙江省高层次人才,黑龙江省特贴专家,食药用菌精深加工团队学术带头人,黑龙江省农产品加工体系食用菌岗主任专家,中国菌物学会木耳产业分会副会长,中国菌物学会食用菌采后与加工产业分会副会长。现在黑龙江省科学院微生物研究所,微生物药物学创新中心,研究员。主要研究食药用菌免疫调节和降三高功效物质挖掘与作用机制研究、东北特色食药用菌黑木耳和猴头菇功能性品种选育及精深加工关键技术研究、食药用菌创新产品加工工艺研究与产品开发。主持和负责完成国家科技支撑、省重大、院市级项目20余项,主持省基金重点项目1 项;黑木耳精深加工关键技术创新与应用,黑龙江省人民政府,科技进步二等奖,2019(第一完成人);授权发明专利20余项,发表包括SCI一区TOP期刊在内的学术论文100余篇;编著《黑木耳资源开发与产业化应用关键技术、功效成分及临床应用》等5 部。研制食用菌多糖、多肽提取物及复合压片糖果、固体饮料、袋泡茶等20余款新产品并实现产业化。
实习编辑:内蒙古农业大学食品科学与工程学院 闫凯;责编:张睿梅
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