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产品名称:R-PE Streptavidin,R-藻红蛋白标记链霉亲和素
1. 核心结构与特性
R-PE荧光特性
光谱特征:激发波长480-565 nm(主峰496/565 nm),发射波长578 nm(橙红色荧光),量子产率高(约0.98),亮度是传统荧光素(FITC)的20-30倍,光稳定性良好,抗光漂白能力强。
分子结构:由藻胆蛋白亚基组成的多聚体,含多个荧光发色团(藻蓝素、藻红素),通过共价键与链霉亲和素偶联,确保标记稳定性。
水溶性:天然水溶性良好,无需有机溶剂辅助,兼容生理缓冲体系(如PBS)。
链霉亲和素特性
来源于链霉菌的四聚体蛋白(分子量约52 kDa),含4个独立生物素结合位点(Kd≈10⁻¹⁴ M),耐受极端pH(2-13)、高温(≤90℃)及变性剂(如SDS)。
低免疫原性,适合生物偶联;通过生物素化标记(如抗体、核酸、纳米颗粒)实现靶向结合,信号放大10-100倍。
偶联结构
R-PE通过化学键(如NHS酯、碳二亚胺)共价连接至链霉亲和素,确保荧光活性与生物素结合能力保留;单个偶联物可结合4个生物素分子,形成高灵敏度检测体系。
2. 操作规范与最佳实践
储存与溶解:干粉试剂-20℃避光保存;工作液用无水DMSO溶解后分装,避免反复冻融;缓冲液推荐使用含0.1% BSA的PBS(pH 7.4)。
反应条件:生物素化标记物与R-PE-链霉亲和素按1:4摩尔比混合,室温孵育30分钟;避免含巯基/氨基的缓冲液竞争反应。
纯化与验证:标记后通过透析、凝胶过滤或HPLC去除游离染料;通过流式细胞术/荧光扫描验证标记效率(≥95%)及生物活性。
安全与废弃物处理:操作需在通风橱中进行,佩戴防护装备;废弃物按生物危害处理;试剂仅限科研使用,不可用于人体。
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